Cat Alas A 6a3v3d

Universidad de Oriente. Núcleo Bolívar. Escuela de Ciencias de la Salud Dr. Francisco Batisttini C Departamento de Ciencias Fisiológicas. Asignatura: Bioquímica.

Asesor: Prof. Maribel Fuenmayor

Bachilleres: Ana Corcega C.I 24.715.939 Adriana Escandon C.I 20.807.028 Rosneidy Gomez C.I 19.859.729 Mariana Pecora C.I 21.250.268 Adriana Sofria C.I 19.871.505 Ana Ybarra C.I 20.904.480

Ciudad Bolívar, Enero 2012

Introducción

Las enzimas son catalizadores muy potentes y eficaces, químicamente son proteínas, como catalizadores, las enzimas actúan en pequeña cantidad y se recuperan indefinidamente. No llevan a cabo reacciones que sean energéticamente desfavorables, no modifican el sentido de los equilibrios químicos, sino que aceleran su consecución o llevan a cabo reacciones que sean energéticamente desfavorables, no modifican el sentido de los equilibrios químicos, sino que aceleran su consecución. La catalasa es una de las enzimas más abundantes en la naturaleza y se encuentra ampliamente distribuida en el organismo humano, aunque su actividad varía en dependencia del tejido; ésta resulta más elevada en el hígado y los riñones, más baja en el tejido conectivo y los epitelios, y prácticamente nula en el tejido nervioso. A nivel celular se localiza en las mitocondrias y los peroxisomas, excepto en los eritrocitos, donde se encuentra en el citosol. Esta enzima es una metaloproteína tetramérica, consta de 4 subunidades idénticas que se mantienen unidas por interacciones no covalentes. Su función es proteger a las células del efecto tóxico del peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) producido en distintas reacciones redox Cataliza la reacción: 2 H2O2 -----------> 2 H20 + O2 Es una de las enzimas más eficientes con una velocidad de aproximadamente 200,000 transformaciones/segundo/subunidad. La actividad enzimática es el número de moléculas de sustrato transformadas por minuto por una sola molécula de enzima(o por un solo centro activo), cuando la enzima es el factor limitante de la velocidad, se basa en la Vmax y tiene unidades de recíproco de tiempo (min.-1).

•

TABLA #1: Efecto de la concentración de sustrato sobre la actividad de la enzima.

Peróxido (ml)

T (min)

mmol de H2O2

ml de KMnO4 gastados

1 2 3 6 1 2 3 6 1 2 3 6 1 2 3 6 1 2 3 6

0,0262 0,0262 0,0262 0,0262 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0748 0,0748 0,0748 0,0748 0,1048 0,1048 0,1048 0,1048 0,1310 0,1310 0,1310 0,1310

2,3 2,7 2,1 2 1,2 1,1 1,8 1,2 20,2 20,5 21,2 21 21,2 22,5 23,2 20,6 12,6 17,4 21,1 22,5

1

2

3

4

5

mmol de H2O2 neutralizado s 0,0115 0,0135 0,0105 0,0100 0,0060 0,0055 0,0090 0,0060 0,1010 0,1025 0,1060 0,1050 0,1060 0,1125 0,1160 0,1030 0,0630 0,0870 0,1105 0,1125

mmol de H202 metabolizado s 0,0147 0,0127 0,0157 0,0162 0,0464 0,0469 0,0434 0,0464 -0,0224 -0,0239 -0,0274 -0,0264 -0,0012 -0,0077 -0,0112 -0,0018 0,068 0,044 0,0205 0,0185

Para los resultados presentados en la tabla anterior fueron calculados de la siguiente manera: 1. La primera columna expresa los (ml) de peróxido utilizados en cada experiencia. 2. La segunda columna indica el tiempo en minutos en los cuales ocurrió la reacción. 3. La tercera columna cuyos resultados reflejan mmol de H2O2 utilizados para la preparación de cada uno de los tubos. 4. La cuarta columna representa los ml de KMnO4 utilizados para la titulación. 5. La quinta columna indica los mmoles de H2O2 remanentes o neutralizados. 6. La sexta columna muestra los mmoles de H2O2 metabolizados.

Fueron utilizados 1, 2, 3, 4 y 5 ml de H2O2 para la preparación de cada uno de los tubos empleados respectivamente. Entonces los mmoles de H2O2 utilizados en cada tubo se calcularon de la siguiente manera: Se utiliza la reacción simplificada entre el permanganato y el peróxido que es la siguiente: 5 H2O2 + 2 MnO4- + 6H+

2Mn 2+ + 5O2 + 8H

Partiendo de esta reacción, en la que 5 mmoles de H2O2 reaccionan con 2 mmoles de KMnO4 y sabiendo que el tubo control tiene un volumen de 26,3ml y se cuenta con una concentración de KMnO4 de 2,0 mmoles/litro, procedemos a utilizar la concentración de KMnO4 y el volumen del tubo control, con el fin de calcular el número de moles de KMnO4 que se necesitan para titular 5ml de de H2O2: N° de KMnO4 = C x V =

2,00mmol/L x 0,0262 L

= 0,0524 mmoles de KMnO4 Calculado los números de moles necesarios ahora se procede a calcular la cantidad de mmoles de peróxido de hidrogeno inicial: 5mmoles H2O2

2mmoles de MnO40,0524 mmoles de MnO4-

X

X= 5mmol H2O2 x 0,0046 de KMnO4 2mmol de KMnO4 X= 0,131 mmol de H2O2

Teniendo ahora calculados los mmoles de peróxido de hidrogeno para 5 ml del mismo compuesto se proceso a calcular los mmoles para 1 y así sucesivamente para 2, 3, 4 ml: 5 ml de H2O2

0,131 mmoles de H202

1 ml de H2O2

X

1ml de H202 x 0,131 mmoles de H2O2 X= 5 ml de H202 X= 0,0262 mmol H202 Los mmoles de H2O2 neutralizados o remanentes, y los mmol de H2O2 metabolizados, se calcularon de la siguiente manera: Concentración MnO4 - = 2,0mmoles/L x Vol. = 5,00ml (pasando ml a litros) N° mmoles= C x V =2,0 mmoles/L x 0,023 L = 0,046 mmoles de MnO4 – 2 mmoles MnO4 –

5mmoles H2O2 X

0,046 mmoles MnO4 – X= 0,0115 mmoles H2O2

Mmoles metabolizados= mmoles iniciales – mmoles remanentes = 0,0262– 0,0115 = 0,0147 mmoles de H2O2 Metabolizados para 1ml

Nota: este es un ejemplo del procedimiento que se realizo para calcular cada uno de los

Valores

obtenidos

en

la

experiencia

con datos diferentes del la tabla n° 1

concentraciones de sustrato. Concentración de sustrato (ml) 1 2 3 4

Vo (mmoles de H2O2 metabolizados/minutos) 0,0413 0,00145 0 0

5

0,02425

Nota: Los datos de la columna de la derecha se extrajeron de las graficas respectivas 1, 2, 3, 4 y 5 anexadas al inicio del informe. Existen múltiples factores que influyen en la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas; uno de esos factores es el sustrato. La enzima se une con una molécula del sustrato para formar un complejo enzima-sustrato (ES), que, a su vez, se disocia en el producto y la enzima, que se recupera:

El sustrato es, casi siempre, más pequeño que la enzima y se une a ésta en un lugar específico llamado sitio activo o foco activo. Típicamente, el sitio activo es una pequeña abertura o hendidura en la estructura tridimensional de la enzima. Por lo general, la concentración del sustrato es mayor que la de la enzima, [S] > [E], por lo que los sitios activos se "llenan" rápidamente: la enzima se satura. La velocidad de una reacción (v) es el número de moléculas de substrato convertidas en producto por unidad de tiempo y usualmente se expresa en µmoles de producto formadas por minuto. La velocidad de una reacción catalizada por una enzima, aumenta conforme se incrementa la concentración de substrato hasta que se llega a una velocidad máxima (Vmax), a partir de la cual la velocidad de la reacción, es independiente de la cantidad de substrato. El que la velocidad no pueda seguirse incrementando, refleja la saturación del sitio activo con por parte del substrato. •

TABLA #3: Efecto de la concentración de enzima.

Catalasa (ml)

0,1

0,2

Tiempo (min)

mmol de H2O2

ml de KMnO4 gastados

1 2 3 6 1 2 3 6 1

0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524

9,1 10,2 9,2 9,2 8,4 9 7,9 10,2 9,7

mmol de H2O2 neutralizado s 0,0455 0,051 0,0046 0,046 0,042 0,045 0,0395 0,0255 0,0485

mmol de H202 metabolizado s 0,0069 0,0014 0,0064 0,0064 0,0104 0,0074 0,0129 0,0269 0,0039

0,4

0,6

2 3 6 1 2 3 6

0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524 0,0524

9,5 8,8 7,1 6,0 5,6 6,7 4,8

0,02375 0,044 0,0355 0,012 0,028 0,0335 0,024

0,02865 0,0084 0,0169 0,0404 0,0244 0,0189 0,0284

En el cuadro anterior, se muestra como varia la reacción con respecto a la concentración de enzima (catalasa) que se agregue, para calcular los mmol de peróxido utilizado inicialmente, los ml de kMn04 gastados, los mmol de peróxido de hidrogeno neutralizados y los metabolizados , se realizaron los siguientes procedimientos : Tubo (1 min) Transformación de ml a L de la cantidad de MnO4 gastado 9,1 ml MnO4 / 1000 = 0,0091 L m.mol MnO4 = 2,0 m.mol/L . 0,0091 L = 0,0182 m.mol MnO4 5 m.mol H2O2 2 m.mol MnO4 X 0,0182 m.mol MnO4 = 0,0455 m.mol H2O2 Remanente

m.mol metabolizados H2O2 = m.mol inicial ~ m.mol remanente = 0,0524 m.mol ~ 0,0455 m.mol = -0,0069 mmol metabolizados H2O2 Nota: el procedimiento para los valores restantes es el mismo del caso anterior, solo se debe cambiar los valores de MnO4 gastados para cada caso. Sin embargo el resultado obtenido de los mmol metalizados resulto negativo dado a un error de laboratorio, el procedimiento siguió siendo el mismo, con diferentes valores y resultados positivos, los cuales si se pudieron graficar. Luego de los valores obtenidos se procedió a graficar el tiempo de la reacción en el eje las X y los mmol de peróxido de hidrogeno metabolizados en el eje de las Y.

En la curva de progreso, cuando se graficó la tangente en la grafica #6 se tomó en cuenta el punto que pasó por la recta y la Vo fue de 0,00168 de la batería 1. Y se calculó de la siguiente manera: Vo = mmol metabolizado 2 – mmoles metabolizados 1/ t2 – t1. Vo = 0,0099 – 0,0015 / 6 – 1 = 0,00168 Estos datos fueron obtenidos, gracias a una tangente que se trazó en la gráfica, partiendo desde 0 en donde dicha tangente tocó uno de los puntos. Este procedimiento se repitió en cada una de las gráficas. En la gráfica #7, se realizó el mismo procedimiento con la diferencia que se le agregó 0,2 ml de catalasa, y siguió aumentando la reacción como en la grafica pasada, notándose que como había más catalasa se tuvo que utilizar mucho más permanganato de potasio para titular, por lo cual los mmoles de peróxido de hidrogeno metabolizados aumentaron, de acuerdo al tiempo y comparado con la gráfica anterior la Vo fue de 0,02475 al minuto de reacción, en esta gráfica la cantidad de peróxido de hidrogeno metabolizado fue aumentando con respecto al tiempo debido a que la reacción tenía 0,2 ml de catalasa. Debido a que la diferencia entre grafica y grafica es la cantidad de enzima utilizada en el experimento los cambios en cada una de las graficas cambia por la cantidad de permanganato de potasio que fue agregado para la descomposición de peróxido de hidrogeno, en agua y una molécula de oxigeno. En La grafica #8, la Vo fue de 0,00306 y en la grafica #9, la Vo fue de 0,0062 . La variación de cada una de las graficas se da debido a que la enzima catalasa no puede ser desnaturalizada tan rápidamente , y se quiso evaluar como variaba según la cantidad de permanganato de potasio suministrado lo que iba a variar los mmoles de peróxido de hidrogeno metabolizados, los cuales se utilizaron para graficar.

Valores

obtenidos

en

la

experiencia

con

diferentes

concentraciones de enzima. Concentración de enzima (ml) 1 2

Vo (mmoles de H2O2 metabolizados/minutos) 0,00168 0,02475

3 4 •

0,00306 0,0062

TABLA #4: Efecto de la variación del pH sobre la actividad

de la enzima. Variación de pH

Tiempo (Min)

mmol de H202

ml de KMnO4 gastado s

m mol de H2O2 neutralizado s

mmol de H202 metabolizado s

1 2 3 6 1 2 3 6 1 2 3 6

0,131 0,131 0,131 0,131 0,131 0,131 0,131 0,131 0,131 0,131 0,131 0,131

15,5 13,8 12,7 9,3 7,8 9,9 8 9,8 10 10,2 8,8 10,2

0,0775 0,069 0,0635 0,0465 0,039 0,0495 0,04 0,049 0,05 0,051 0,044 0,051

0,0535 0,062 0,0675 0,0845 0,092 0,0815 0,091 0,082 0,081 0,08 0,087 0,08

5

7, 2

11

Para los resultados presentados en la tabla anterior fueron calculados de la siguiente manera: 1. La primera columna refleja las diferentes concentraciones de pH que se utilizaron. 2. La segunda columna indica el tiempo en minutos en los cuales ocurrió la reacción. 3. La tercera columna muestra los resultados en mmol de H2O2 utilizados para la preparación de cada uno de los tubos. Fueron utilizados 5 ml de H2O2 para la preparación de cada uno de los tubos que serian sometidos a cambios de pH. Entonces los mmoles de H2O2 utilizados en cada tubo se calcularon de la siguiente manera: Se utiliza la reacción simplificada entre el permanganato y el peróxido que es la siguiente: 5 H2O2 + 2 MnO4- + 6H+

2Mn 2+ + 5O2 + 8H

Partiendo de esta reacción, en la que 5 mmoles de H2O2 reaccionan con 2 mmoles de KMnO4 y sabiendo que el tubo control tiene un volumen de 26,3ml y se cuenta con una concentración de KMnO4 de 2,0 mmoles/litro, procedemos a utilizar la concentración de KMnO4 y el volumen del tubo control, con el fin de calcular el número de moles de KMnO4 que se necesitan para titular 5ml de de H2O2: N° de KMnO4 = C x V 2,00mmol/L x 0,0262 L = 0,0524 mmoles de KMnO4 0,0526 mmol KMnO4 es la cantidad necesaria para titular 5ml •

Entonces: 5mmol H2O2 X

2mmol de KMnO4 0,0524 de KMnO4

X= 5mmol H2O2 x 0,0526 de KMnO4 2mmol de KMnO4 X= 0,131 mmol de H2O2 1. La cuarta columna representa los ml de KMnO4 utilizados para la titulación. 2. La quinta columna representa los mmoles de H2O2 neutralizados o remanentes, y la sexta columna representa los mmol de H2O2 metabolizados, los cuales se calcularon de la siguiente manera:

pH 5 TUBO 1

tiempo = 1 minuto

15,5ml KMnO4= 0,0155 L KMnO4 mmol KMNO4 = 2, 00 mmol/L x 0,0155 L mmol= 0,031 mmol KMnO4.

Entonces los mmoles remanentes los calculamos de la siguiente manera: 5 mmol H2O2 X

2mmol KMnO4 0,031 mmol KMnO4

X= 0,0775 mmol H2O2 Para calcular los mmol metabolizados: Mmol metabolizados= mmoles iniciales – mmoles remanentes Mmoles metabolizados= 0,131 mmol de H2O2 - 0,0775 mmol H2O2 Mmol metabolizados = 0,0535 mmol de H2O2 NOTA: se repite el mismo procedimiento para los tubos restantes, los valores están expresados en la tabla. “El índice de casi todas las reacciones catalizadas por enzimas muestra una dependencia importante de la concentración de ión hidrógeno entre 5 y 9. La relación entre actividad y concentración de ión hidrógeno refleja el equilibrio entre la desnaturalización de enzimas a pH alto o bajo, y los efectos sobre el estado cargado de la enzima, los sustratos o ambos. Para enzimas cuyo mecanismo comprende catálisis acidobásica, los residuos comprendidos deben estar en el estado de protonación apropiado para que la reacción proceda. La unión y el reconocimiento de moléculas de sustrato con grupos disociables típicamente también comprenden la formación de puentes salinos con la enzima. La ganancia o pérdida de grupos cargados cruciales afecta de manera adversa la unión a sustrato y, así retardará la catálisis”. (Harper, 2010. Pág. 66) Partiendo de esta idea podemos inferir sobre los cambios producidos experimentalmente gracias a los efectos de pH. La experiencia realizada con pH 5 metabolizó menos mmoles de peróxido de hidrógeno que la experiencia realizada con pH 11 debido a que el pH 5 está fuera de los parámetros de pH

relativamente apropiados para que se lleve a cabo la reacción enzimática, mientras que a pH 11 la enzima se vuelve un poco más inactiva; también puede notarse que a pH 7,2 (pH fisiológico) la enzima puede

metabolizar

mayor cantidad de peróxido de hidrógeno, pudiendo así cumplir a cabalidad su función biológica, al descomponer el H202 formado en algunas reacciones del metabolismo celular y el cual es tóxico para nuestro organismo.

Valores

obtenidos

en

la

experiencia

con

diferentes

concentraciones de pH. Concentración de ph 5 7,2 11

•

Vo (mmoles de H2O2 metabolizados/minutos) 0,015 0,015 0,047

TABLA #5: Efecto de la variación de la temperatura sobre la actividad de la enzima

Temperatur a (°C)

Tiemp o (min.) 1 2

0°C 3 6 1 2 37°C 3 6 1 2 40°C 3 6 1 60 °C

2 3 6

mmo l de H2O2 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1 0,13 1

ml de KMnO4 gastado s

mmol de H2O2 neutralizado s

mmol de H2O2 metabolizado s

18

0,09

0,041

15,7

0,0785

0,0525

13,8

0,069

0,062

6,5

0,035

0,096

25

0,125

0,006

17,5

0,0875

0,0435

14,7

0,0735

0,0575

10,3

0,0515

0,0795

20

0,1

0,031

17,5

0,0875

0,0435

16,1

0,0805

0,0505

10

0,05

0,081

28

0,14

-0,009

29

0,145

-0,014

29,5

0,147

-0,016

24

0,115

0,016

Nota: los datos para 60°C no fueron graficados por errores experimentales a la hora de realizar el procedimiento. Para los resultados presentados en la tabla anterior fueron calculados de la siguiente manera:

1. La primera columna indica la temperatura en °C en los cuales ocurrió la reacción 2. La segunda columna indica el tiempo en minutos en los cuales ocurrió la reacción. 3. La tercera columna cuyos resultados reflejan mmol de H2O2 utilizados para la preparación de cada uno de los tubos. Fueron utilizados 5 ml de H2O2 para la preparación de cada uno de los tubos empleados en cada temperatura. Entonces los mmoles de H2O2 utilizados en cada tubo se calcularon de la siguiente manera:

Partiendo de la relación establecida anteriormente a partir del blanco: 0,0524 mmol KMnO4 es la cantidad necesaria para titular 5ml

Entonces: 5mmol H2O2

2mmol de KMnO4

X

0,0524 de KMnO4

X= 5mmol H2O2 x 0,0526 de KMnO4 2mmol de KMnO4 X= 0,131 mmol de H2O2 4. La cuarta columna representa los ml de KMnO4 utilizados para la titulación. 5. La quinta columna representa los mmoles de H2O2 neutralizados o remanentes,

y

la

sexta

columna

representa

los

mmol

metabolizados, los cuales se calcularon de la siguiente manera: TEMPERATURA 0oC TUBO 1

tiempo = 1 minuto

18ml KMnO4= 0,018 L KMnO4

de

H2O2

mmol= 2, 00 mmol/L x 0,018 L KMnO4 mmol= 0,036 mmol KMnO4. Entonces: 5 mmol H2O2

2mmol KMnO4 0,036 mmol KMnO4

X= 0,09 mmol H2O2 Para calcular los mmol metabolizados: Mmol metabolizados= mmoles iniciales – mmoles remanentes Mmoles metabolizados= 0,131 mmol de H2O2 - 0,09 mmol H2O2 Mmol metabolizados = 0,041 mmol de H2O2 NOTA: se repite el mismo procedimiento para los tubos restantes, los valores están expresados en la tabla. “Aunque la elevación de la temperatura incrementa la velocidad de una reacción catalizada por enzimas, esto es verdad solo dentro de límites estrictos de temperatura. Al principio la velocidad de la reacción aumenta cuando la temperatura se eleva, debido al incremento de la energía cinética de las moléculas reactantes. Sin embargo, al final, la energía cinética de la enzima excede a la barrera energética para romper los enlaces débiles de hidrogeno e hidrófobos que conservan su estructura

secundaria-terciaria.

A

esta

temperatura

predomina

la

desnaturalización con pérdida precipitada de la actividad catalítica”. (Rodwell, Victor W 1997 pág. 98) En general, los aumentos de temperatura aceleran las reacciones químicas: por cada 10ºC de incremento, la velocidad de reacción se duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser proteínas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reacción debido a la temperatura es contrarrestado por la pérdida de

actividad

catalítica debida a la desnaturalización térmica, y la actividad

enzimática decrece rápidamente hasta anularse.

Gráfica T : Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática. La grafica T es un ejemplo del modelo de gráfica que se espera obtener cuando se analiza la actividad catalítica de una enzima como la catalasa en función al efecto de la temperatura. En la experiencia se estudio este efecto (temperatura) con la enzima catalasa a la cual se le sometió a diversas temperaturas (0°C, 37°C, 40°C y 60°C) y a diversos tiempos (1 min., 2 min., 3 min. y 6 min.); al graficar cada una de las temperaturas tenemos una curva de progreso, que nos proporcionará la velocidad inicial (Vo) de la reacción. Esta ayudará a graficar Velocidad vs. Temperatura. Al someter la enzima a una temperatura baja se inactiva, por ello se puede observar que a temperatura de cero grados centígrados la actividad enzimática es poca, sin embargo al colocar la enzima a 37 oC, esta recupera su actividad catalítica, y de acuerdo a la curva de progreso antes observada es de notar que a esta temperatura la enzima se encuentra en su temperatura optima, esto es favorecedor, ya que la temperatura corporal se encuentra en los 37oC lo que implica que todas las reacciones en las que interviene esta enzima no se ven afectadas por la temperatura al contrario es favorecedor para el optimo funcionamiento del organismo. Al estudiar la actividad de esta enzima a una temperatura de 40 oC la grafica de progreso arroja una representación bastante peculiar, debido a que a esta temperatura la actividad de la enzima tuvo una variación mínima, lo que indica que en presencia de una patología que implique el incremento de la temperatura corporal por encima de la temperatura normal (hipertermia) no implica un peligro mayor para la persona; la ultima experiencia para evaluar el

efecto de la temperatura fue con una temperatura de 60oC que aunque no se pudo graficar los valores obtenidos debido a que hubo una falla experimental, por inferencia de acuerdo a estudios realizados se puede deducir que esta temperatura modifica la estructura proteica de la enzima y por ende su función, de manera tal que la enzima es desnaturalizada perdiendo así su actividad catalítica de manera irreversible debido a que las fuerzas débiles de unión se rompen afectando su estructura terciaria. La velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas depende de varios factores, tanto físicos como químicos, en este caso el factor físico a analizar es la temperatura. Dado que la estructura proteínica determina la actividad de una enzima, cualquier factor que modifique su configuración afectará su función. El proceso de desnaturalización proteínica debido a su incremento en la temperatura conducirá una modificación de la actividad. Para concluir usaremos la siguiente cita: “El estudio de la cinética enzimática – los factores

que afectan los índices de reacciones

catalizadas por enzimas— revela los pasos individuales mediante los que las enzimas transforman sustratos en productos. La temperatura, la concentración de pH, la concentración de enzima y a concentración de sustrato y los inhibidores, afectan los índices de reacciones catalizadas por enzimas”. (Harper, 2010. Pág. 66)

Conclusión Se describió como varía la velocidad inicial de una reacción enzimática en función de la concentración de sustrato y concentración de enzima, clasificadas por órdenes de reacción. Se determino el efecto de: –

el ph, específicamente 5, 7.2 y 11 en la actividad de la catalasa, y

el ph optimo de la enzima, en donde por encima o debajo de este su actividad catalica disminuye. –

las temperaturas, 0°C; 37°C; 40°C; 60°C en la actividad de la

–

Los inhibidores, deteniendo la reacción en los experimentos

enzima.

realizados. Para los cuales cada uno de estos factores afecta considerablemente la catálisis enzimática. Asi mismo, se logro describir y comprobar la función biológica que cumple la catalasa a través de la experimentación de laboratorio. Por su parte, se logro especificar la velocidad inicial de la catalasa a diferentes concentraciones de sustrato, recordando que esta concentración es proporcional a dicha velocidad inicial (Vo). También, se determino como actúa la catalasa en cuanto a ph y temperatura bajo condiciones saturantes de sustrato. Igualmente se conoció el efecto del cianuro de potasio, bajo concentraciones saturantes en la actividad de dicha enzima.

Se elaboraron gráficas para cada prueba experimental realizada en el laboratorio, de la concentración de sustrato, actividad enzimática, variación de pH, temperatura y variación en presencia de inhibidores, a partir de datos de Vo

BIBLIOGRAFIA David, N. y M, M.(2009) Lehninger Principios de la Bioquímica. 5ta edición, (Barcelona) 5ta Edición. Editorial OMEGA Munray, R., Granner, D., Mayes, P., Rodwell, V. (1996) Bioquímica de Harper, (México, D.F) 14vo Edición. Editorial el Manual Moderno. Munray, R., Rodwell, V. Botham, K. (2010) Bioquimica de Harper, (México, D.F) 28va Edición. Mc Graw- Hill Interamericana Editores, S.A. de C.V.