Manual De Control Autocida De La Mosca Del Mediterraneo 436v5h

MANUAL DE CONTROL AUTOCIDA DE LA MOSCA DEL MEDITERRANEO (Ceratitis capitata Wied.) POR EL SISTEMA DE ADULTO FRÍO

I. INTRODUCCION La presencia de la plaga Mosca de la Fruta del Mediterráneo, ocasiona pérdidas de cosechas y dificulta el intercambio comercial entre áreas infestadas y áreas libres. Por esta situación es necesario controlar y erradicar este insecto en diversos países de América. El Programa Regional Moscamed fue creado con el objetivo de erradicar la plaga Mosca del Mediterráneo de Guatemala y Sur de México, en el Estado de Chiapas. El programa actúa con diversas operaciones de campo de alta tecnología para cumplir con este objetivo. Esta tecnología está integrada por una serie de sistemas de acciones coordinadas, compatibles con el medio ambiente. Cada una de las acciones, está sujeta a un estricto control de calidad que tiene como marco de referencia los manuales de procedimientos. Para el caso de la acción de Control/Erradicación mediante la utilización de insectos estériles, se aplica el presente Manual de Control Autocida de la mosca del Mediterráneo por el Sistema de Adulto Frío. Este manual contiene políticas y procedimientos con la descripción de la actividad, encaminada a ser una guía práctica para entrenar rápidamente al personal para alcanzar los estándares de calidad establecidos por el Programa Regional Moscamed. Se espera que los empleados apliquen este manual y con ello incrementen su experiencia, considerando que es una herramienta de trabajo que documenta la tecnología disponible. Con la aplicación de este manual se pretende alcanzar los objetivos del Control y Erradicación de la plaga en el área de influencia del Programa Regional Moscamed.

II. OBJETIVOS 2.1 De la actividad Consolidar la erradicación de las poblaciones silvestres de la mosca del Mediterráneo en un área determinada, a través de la liberación masiva de insectos estériles (machos) que inducen esterilidad al aparearse con hembras silvestres en el campo. 2.2 Del manual Establecer los procedimientos para proporcionar al material biológico recibido (pupa) las condiciones óptimas ambientales y de alimentación para un buen desarrollo fisiológico, que permita conservar la calidad del mismo, logrando con esto la liberación de adultos competitivos en un proceso de erradicación. Proveer una guía técnica para el desarrollo de las actividades de recepción, empaque de pupas y liberación de moscas del Mediterráneo estériles, mediante el sistema de adulto frío, transmitiendo conocimientos basados en la experiencia y validación técnica, que permita orientar eficazmente la ejecución y supervisión de las diferentes actividades del control autocida.

III. TRANSPORTE Y RECEPCIÓN DE PUPA 3.1 Transporte de la planta de producción a los Centros de Empaque. Al transportar la pupa se deben cumplir los requisitos de seguridad, condiciones ambientales y utilización de contenedores adecuados. Es recomendable evitar movimientos bruscos y golpes que provocan compactaciones, así como la exposición a la luz solar y altas temperaturas que pueden causar daños irreversibles al insecto por el incremento en el calor metabólico. a) Tipos de transporte: •Terrestre: Se deben utilizar vehículos con equipo thermo-King, que permitan mantener la temperatura en un rango de 18 + 1°C. La capacidad de carga del vehículo varía de acuerdo a la cantidad de material biológico que se transportará. •Aéreo: En el caso que por emergencia se requiera transportar el material biológico por vía aérea, se debe contar con personal especializado y supervisar constantemente los movimientos de embarque, traslado y desembarque. b) Contenedores para el transporte de pupa: •Cajas de cartón: Especialmente diseñadas, cada una tiene capacidad para 11 bolsas plásticas, tipo Hussman (250,000 pupas por bolsa) o 23 bolsas plásticas tipo Gamacell (125,000 pupas por bolsa). Una caja con bolsas tipo Hussman tiene un peso de 57 libras conteniendo 2.7 millones de pupas y una caja con bolsas tipo Gamacell tiene un peso de 60 libras conteniendo 2.875 millones de pupa. La temperatura del interior de las bolsas, es regulada de 16 a 18°C con la adición de dos piezas de hielo seco en los extremos de cada caja, sellándose para conservar la temperatura deseada (Figuras 1 y 2).

•Canastillas plásticas: Cada una de éstas tiene capacidad de 5 bolsas tipo Hussman y 12 tipo Gamacell. Una canastilla con bolsas tipo Hussman tiene un peso de 26 libras conteniendo 1.125 millones de pupas y una canastilla conteniendo bolsas tipo Gamacell tiene un peso de 30 libras conteniendo 1.350 millones de

pupas. Este tipo de canastillas no son herméticas, para permitir el paso de aire frío que emite el sistema del vehículo (Figuras 3 y 4).

3.2 Ingreso al Centro de Empaque a) Verificar la temperatura que presenta el contenedor del vehículo transportador. b) Se debe contar con una sala de recepción con capacidad para almacenar la cantidad de pupa diaria a empacar, es importante verificar el rango de temperatura óptima (16 a 18° C), para mantener el material biológico a esa temperatura hasta que sea empacado. c) Monitorear, al azar, la temperatura al menos de 5 bolsas por envío (18 ± 1 ° C). d) Verificar el orden y cantidad de lotes recibidos y distribuir el material en la sala de recepción, verificando por medio de la filmina dosimétrica que la pupa fue irradiada. e) Toma de muestras por personal de control de calidad para determinar el volúmen de pupa/bolsa a empacar y para evaluación de parámetros de control de calidad. En este momento se rompe la hipoxia, cortando la parte superior de las bolsas. Es importante mantener la hipoxia hasta el momento del empaque de cada lote. f) Durante el proceso de recepción y empaque se toman datos del material biológico; lote, mezclada, número de colecta, cantidad de pupa y condiciones ambientales (Anexo I, Formato 1). 3.3 Materiales y equipo de recepción a) Sala de recepción de pupa: Las medidas del área varían de acuerdo a la cantidad de material biológico a recibir, debe mantener una temperatura de 16 a 18°C, durante todo el tiempo de empaque. En este momento se toman datos como: fecha de irradiación, número de sala, encargado de sala, nombre del dosificador de pupa (pipero), pupa/kg, millones de pupa, cantidad de bolsas, inicio y fin de hipoxia, etc. (Anexo I, Formato 2). b) Termómetros. c) Higrotermómetros. IV. PREPARACIÓN DE ALIMENTO PARA EL ADULTO 4.1 Alimento a base de Agar a) Ingredientes

Para la preparación del alimento se utilizan ollas eléctricas de acero inoxidable (marmitas) con capacidad de 200 litros de agua. Las cantidades de los ingredientes utilizados para el empaque de 19.5 millones de pupa son los siguientes:

b) Materiales y equipo para la preparación del alimento • Sala de preparación: Las medidas varían de acuerdo a la cantidad de alimento a preparar, debe contar con la adecuada ventilación. •Marmita: La cual tiene capacidad para 200 litros de agua, consta de un sistema de termostato trifásico, opera con corriente eléctrica de 220 voltios. •Charolas de fibra de vidrio: Charolas con capacidad para 10 litros y con medidas de 77.5 X 40.5 X 10 cm. •Guantes de cuero, mascarillas, cinturón o faja de uso rudo, gabachas o mandiles de plástico, lentes de protección y espátulas. Dentro del área de elaboración de dieta se deben de mantener las normas de seguridad a todo momento, para evitar cualquier riesgo de accidente o contratiempo (quemaduras, caídas, fracturas, daños a los equipos, etc.). c) Procedimiento de preparación • Pesado de ingredientes: agar, benzoato de sodio y azúcar. •Mezclado homogéneo de ingredientes (agar y benzoato de sodio) en agua fría por separado para vaciarlo a la marmita (Figura 5). • Se enciende la marmita. • Al considerar que la mezcla está llegando a su punto de ebullición se agrega el azúcar y se mezcla para diluir todos los ingredientes, esto se realiza con un agitador de madera. (Figura 6). • Se mantiene en cocción durante un período de 90 minutos.

•La mezcla ya preparada se traslada a charolas de fibra de vidrio para enfriamiento (Figura 7). • El tiempo de enfriamiento es de 30 minutos utilizando ventiladores. • Se corta el alimento en la misma charola, de donde se obtienen 8 porciones de 20 por 20 cm y 1.5 cm de grosor (Figura 8 y 9).El alimento se traslada a la sala de empaque, donde será colocado sobre cada caja cargada con pupa.

4.2 Alimento Seco a base de Azúcar + Proteína hidrolizada a) Ingredientes Para la preparación se utiliza olla metálica con capacidad de 100 litros y un quemador a base de gas para preparar alimento para 26 millones de pupas. Los ingredientes utilizados son los siguientes:

b) Materiales y equipo para la preparación del alimento • Sala de preparación: Las medidas varían de acuerdo a la cantidad de alimento a preparar, debe contar con la adecuada ventilación. • Olla metálica de aproximadamente 100 litros de capacidad. •Quemador para flujo de gas conectado a depósito o cilindro. •Espátulas, brochas de cerda gruesa de 6 pulgadas de ancho, papel de extraza de 20 cm de ancho calibre 40g, mesas de trabajo metálicas o de cemento, estantes metálicos o de madera, guantes de cuero, mascarillas con visor, cinturón o faja de uso rudo y gabachas o mandiles de plástico. c) Procedimiento de preparación • Previo a la preparación del alimento se requiere tener a la disposición tramos de papel de estraza de aproximadamente 1 metro de largo. • Se realiza el pesado de los ingredientes: azúcar, fécula de maíz (maizena) y proteína hidrolizada. •Agregar el azúcar a la olla, sin encender la estufa o quemador, posteriormente se agrega la maizena, haciendo una mezcla manual de estos ingredientes con el objetivo de que la maizena quede homogéneamente mezclada con el azúcar, ya que actúa como secante. • Enseguida, se procede a agregarle poco a poco los 8 litros de agua, mezclando bien hasta que todo quede completamente diluido. •Luego se procede a encender la estufa e inicia la cocción del alimento hasta llegar al punto de ebullición, durante este tiempo se remueve la mezcla constantemente para evitar que se adhiera en el fondo de la olla y se queme, mientras se disuelve la proteína en 2 litros de agua fría evitando la formación de grumos. • Al tener la proteína hidrolizada disuelta, y la mezcla esté hirviendo se comienza a vaciar lentamente, removiendo con la espátula y enseguida se apaga la estufa. • Cuando el alimento está listo, se procede a impregnar los tramos de papel de estraza, utilizando las brochas para este fin, aproximadamente 100 gramos por cada tira de papel (figura 10). •Una vez que el alimento está impregnado en los trozos de papel se procede a colocarlos en un anaquel para su secado en un área con temperatura de 22 ± 1°C, permaneciendo por espacio de 1 día para su secado y disponibilidad (figura 11).

d) Preparación de esponjas con agua En el caso del sistema de alimentación a base de proteína hidrolizada y azúcar, es necesario la adición de agua, utilizando como medio de retención, esponjas impregnadas con agua y goma guar (figura 12).

•Materiales e ingredientes − Esponjas de aproximadamente 15 cm de largo por 8 cm de ancho y 1 cm de grosor. − Charolas de fibra de vidrio con medidas de 77.5 X 40.5 X 10 cm. − Tamiz. − La formulación es de 1 litro de agua por 5 gramos de goma guar. •Procedimiento de preparación − Pesado de la goma guar (5 gramos para 10 esponjas). − Se prepara la cantidad de agua requerida, para posteriormente adicionar la goma, de manera lenta utilizando un tamiz para evitar la formación de grumos, ya que reducen la viscosidad lo cual provoca escurrimientos posteriores dentro de las cajas parc. − Una vez preparada la mezcla se impregnan las esponjas de manera total,

logrando una turgencia suficiente sin escurrimiento (100 ml por esponja). − Finalmente se colocan las esponjas en charolas de fibra de vidrio y se transportan a las salas de emergencia para su colocación sobre las tapas de las cajas parc de los lotes empacados el día anterior. 4.3 Alimento Seco formulado con Azúcar + Proteínas naturales − La formulación del alimento es una mezcla de harinas finas de amaranto y cacahuate y azúcar refinada. Su presentación en polvo fino tiene un contenido de 87.10% de azúcar, 10.10% de proteína natural y 2.7 de maizena como secante. Tiene un PH de 6.5 U.I, acidez de 0.133%, humedad de 4.34%, Las características microbiológicas corresponden a 23,750 UFC/g de cuenta total, menos de 10 UFC/g de hongos, menos 10 UFC/g de levaduras y menos de 3 NMP/g de coliformes totales tipo 1 no fecales. − Esta formulación del alimento ha sido evaluada por el Área de Desarrollo de Métodos del Programa Moscas de la Fruta y han obtenido resultados similares a la receta casera empleada actualmente en el CEAF de Tapachula. − La ventaja de cambiar a esta formulación es que no se tiene que cocinar, ahorrando mano de obra y riesgos de accidentes por uso de estufa industrial de gas y daños a la salud, por exposición a cambios bruscos de temperaturas para la cocción, enfriamiento y secado. La formulación del polvo seco es altamente adherente a las paredes del papel plastificado donde se proporciona el alimento a las moscas estériles. − El alimento se coloca con brochas sobre cartón corrugado plastificado con una dosificación de 1.7 a 2.0 Kg por millón de pupas empacadas. − El agua se proporciona con esponjas o almohadillas de tela de algodón de manera similar al inciso d. V. EMPAQUE DE LA PUPA Y EMBALAJE EN SALAS DE EMERGENCIA 5.1 Materiales y equipo a) Salas de empaque: Deberá ser con sistema de aire acondicionado, con mecanismo de extracción de polvos, buena iluminación y de tamaño adecuado dependiendo de la cantidad de millones de pupas a empacar. b) Salas de emergencia: Deben de ser herméticas, con sistema de aire acondicionado e iluminación adecuada. El área dependerá, de la cantidad de millones de pupas a emerger. c) Parc-Box: Cajas plásticas de 60 X 49 X 33 cm, con malla metálica a los lados y en la parte central de la tapadera, para propiciar una adecuada ventilación y poder colocar la porción de alimento. d) Depósitos para pupa: Bandejas, tienen capacidad de 2.5 a 3 millones de pupa. e) Medida para empacar: Recipientes plásticos con las medidas de acuerdo a la cantidad de pupa a aplicar por bolsas. f) Engrapadoras de metal de uso industrial, troques o diablitos, ganchos plásticos o metálicos tipo “J”, mascarillas, cinturón o fajas para uso rudo, bolsas de papel kraft ( 27 X 21 X 13 cm ), overoles, cuerdas elásticas, porción de alimento, papel encerado, guantes de cuero, gabachas plásticas, lentes de protección y grapas. 5.2 Procedimiento de Empaque a) La cantidad de pupas a empacar en cajas Parc esta en función de la superficie de interior de reposo considerando que la máxima densidad debe ser de 2 moscas por cm2. Una caja parc con 6 bolsas de empaque y 4 tramos de papel de 45 x 24 cm tiene una superficie disponible de 29,000 cm2, para un total de 58,000 moscas

emergidas. En el caso de que no se proporcionen los 4 tramos de papel la superficie de reposo es de 20,360 cm2 para un total de 40,720 moscas emergidas. b) Distribución de pupas por caja Dentro de cada caja Parc con alimento a base de agar se colocan 45,000 pupas, distribuidas en 6 bolsas de papel Kraft a 7,500 pupas cada una. Dentro de cada caja con alimento seco con 4 tramos de papel la cantidad de pupas a colocar es de 70,000, distribuidas en 6 bolsas de papel kraft a 11,670 cada una, cuya medida está en función del tamaño de la pupa (figuras 13, 14 y 15).

Las bolsas se engrapan en la parte media superior, quedando libres las partes laterales superiores de la bolsa para permitir la salida del insecto adulto al emerger, luego se procede a colocar la tapa en las cajas, colocando la porción de alimento sobre el cedazo (Figura 15 y 16).

c) Preparación de perchas o estibas. Cuando el empaque de cada caja finaliza, éstas se colocan una sobre otra (en perchas o estibas de 6 cajas cada una) sujetándolas con cuerdas elásticas, quedando preparadas para ingresar a las salas de emergencia (Figura 17). d) Traslado de perchas o estibas a salas de emergencia El traslado del material biológico a las salas de emergencia se realiza por medio de troques o diablitos, donde permanecerán por un tiempo de, al menos, 5 días para

alcanzar la madurez sexual, a una temperatura constante de 21 a 23°C y una humedad relativa de 65 a 70 % (Figura 18).

e) Distancia entre perchas o estibas Las perchas o estibas son colocadas dentro de las salas de emergencia a una distancia de 25 a 31 cm. entre columnas y 25 cm. entre filas, para proporcionar condiciones ambientales uniformes (Figura 19 y 20).

f) Luminosidad Las salas de emergencia deben manejarse a condiciones de baja luminosidad adecuada para que el adulto emergido permanezca en reposo y conserve su energía hasta su liberación en el campo. g) Salas de emergencia Las instalaciones destinadas a la emergencia de las pupas estériles, deben tener capacidad para emerger y manejar el material biológico requerido y previamente considerado para cubrir semanalmente las zonas de trabajo sujetas a liberación de mosca estéril. Las salas de emergencia deben estar diseñadas para conservar la temperatura y brindar protección contra roedores, hormigas, cucarachas y otros insectos. Para el monitoreo de la humedad relativa y temperatura se usan higrotermógrafos y

termómetros, con estos últimos las lecturas deberán hacerse por lo menos a cada 4 horas (Anexo I, Formato 3). 5.3 Sistema de empaque mecanizado. a) Materiales y equipo • Salas de empaque: Deberá ser con sistema de aire acondicionado, con mecanismo de extracción de polvos, buena iluminación y de tamaño dependiente del volumen a empacar. • Salas de emergencia: Deben de ser herméticas, con sistema de aire acondicionado e iluminación adecuada. El área dependerá, del volumen del material a empacar. •Banda transportadora: El sistema mecanizado consta de 1 motor de 1.5 hp, operado con corriente eléctrica, que mueve una banda de lona gruesa sobre un sistema de rodillos, con una longitud de 7 metros. • Cajas parc: Cajas plásticas de 60 X 49 X 33 cm, con malla metálica a los lados y en la parte central de la tapadera, para propiciar una adecuada ventilación y poder colocar la esponja con agua. •Depósitos para pupa: el cual tiene una capacidad de 2 a 2.5 millones de pupas. •Medida para empacar: Recipientes plásticos con las medidas de acuerdo a la cantidad de pupa a aplicar por bolsas. •Engrapadoras de metal de uso industrial. • Troques o diablitos, ganchos plásticos tipo J, mascarillas, cinturón o fajas para uso rudo, bolsas de papel kraft ( 27 X 21 X 13 cm ), overoles, cuerdas elásticas, lentes de protección y grapas. b) Procedimiento de empaque mecanizado Permite realizar la actividad en una menor área, en menor tiempo y con menos cantidad de personas, ya que los diferentes pasos del proceso se realizan sobre una banda transportadora accionada por un motor eléctrico, facilitando la actividad y una supervisión directa. Pasos que se siguen: • Colocación de bolsas abiertas al inicio de la banda; dejando una distancia de 20 cm entre bolsas (Figura 21). • Cargado de pupa en cada bolsa (11,670 pupas). •Engrapado de las bolsas en la parte superior media, dejando los espacios laterales libres para permitir la salida del adulto. •Colocación de las bolsas dentro de las cajas. •Tapado de las cajas. •Las cajas una vez preparadas se estiban una sobre otra en número de seis, siendo sujetadas con cuerdas elásticas para evitar fugas y darle firmeza a la percha o estiba. •Las perchas o estibas son trasladadas en troques o diablitos a las salas de emergencia donde permanecerán por al menos 5 días a una temperatura de 21 a 23°C y una humedad relativa de 60 a 70%. Se deben efectuar monitoreos de temperaturas y humedad relativa por al menos cada 4 horas.

•El área debe estar acondicionada con baja luminosidad, evitando el desgaste del insecto macho antes de la liberación. •Es recomendable brindar el manejo preventivo al sistema de banda, para evitar contratiempos durante la actividad. 5.4 Sistema de empaque de torres. a) Materiales y equipo • Salas de empaque: Deberá ser con sistema de aire acondicionado, con mecanismo de extracción de polvos, buena iluminación y de tamaño dependiente del volumen a empacar. • Salas de emergencia: Deben de ser herméticas, con sistema de aire acondicionado e iluminación adecuada. El área dependerá, del volumen del material a empacar. •Medida para empacar: Recipientes plásticos con las medidas de acuerdo a la cantidad de pupa a aplicar por criba. •Mascarillas, cinturón o fajas para uso rudo, porción de alimento, gabachas plásticas y lentes de protección. 5.5 Procedimiento de Empaque La cantidad de pupas a empacar en cada criba está en función de la superficie de interior de reposo considerando que la máxima densidad debe ser de 2 moscas por cm2. Una criba tiene una superficie disponible de 11,034 cm2, para un total de 22,068 moscas emergidas. Se están colocando 25,000 pupas por criba, considerando un 85% de emergencia, se tiene una población de 21,250 moscas por criba. b) Distribución de pupas por criba Dentro de cada contenedor de pupa (canaleta) se adicionan 12,500 pupas con un recipiente graduado en volumen de acuerdo al peso de pupa (Figura 22).

Se depositan 25,000 pupas por criba, en el caso de Tapachula y 24,000 pupas por criba en el caso de Guatemala, distribuidas equitativamente en dos contenedores (Figura 23), quedando espacio libre para permitir la salida del insecto adulto al emerger, luego se procede a colocar la parte superior de la criba, colocando la porción de alimento sobre ésta, en Guatemala se coloca una porción y en el caso de Tapachula se colocan dos porciones (Figura 24 y 25).

c) Preparación de torres Cuando la preparación de las cribas finaliza, éstas se colocan una sobre otra (en torres de 24 cribas), se le colocan ganchos externos plásticos para presionar a las dos cribas y así queda preparada para ingresar a salas de emergencia (Figura 26 y 27).

d) Traslado de torres a salas de emergencia El traslado del material biológico a las salas de emergencia se realiza por medio de las mismas torres ya que tienen instalado llantas en la parte inferior, donde permanecerán por tiempo de al menos 5 días, a una temperatura constante de 21 a 23°C y una humedad relativa de 60 a 70 %. Las torres son colocadas dentro de las salas de emergencia a una distancia de 05 a 10 cm para proporcionar condiciones ambientales uniformes (Figura 28 y 29).

e) Luminosidad Las salas de emergencia deben manejarse a condiciones de mínima luminosidad para que el adulto emergido permanezca en reposo y conserve su energía hasta su liberación en el campo. f) Salas de emergencia Las instalaciones destinadas a la emergencia de las pupas estériles, deben tener capacidad para recibir, empacar y emerger el material biológico requerido y previamente considerado para cubrir semanalmente las zonas de trabajo sujetas a liberación de mosca estéril. Las salas de emergencia deben estar diseñadas para conservar la temperatura y brindar protección contra roedores, hormigas, cucarachas y otros insectos. Para el monitoreo de la humedad relativa y temperatura se usan higrotermógrafos y termómetros, efectuándose con estos últimos, lecturas cada 4 horas (Anexo I, Formato 3). g) Alimento a base de Agar Para el caso del CEAF Tapachula se utiliza el mismo que en las cajas Parc, de acuerdo a la cantidad de pupa. Utilizando una porción de dieta por criba. En el caso del CEAF Retalhuleu se utiliza una mezcla conteniendo menor cantidad de Agar.

h) Alimento a base de proteína hidrolizada y azúcar. Se utiliza el mismo que en las cajas Parc, de acuerdo a la cantidad de pupa. Utilizando dos porciones de dieta por criba.

VI. LIBERACIÓN Las actividades necesarias para preparar el material biológico (previas a realizar el vuelo de liberación). 6.1 Colecta de material biológico a) Al quinto día después del empaque, el material biológico alcanza la madurez adecuada para ser liberado. Las cajas Parc con los adultos son trasladadas a cuartos fríos que tienen capacidad para 14-16 millones de adulto volador, los cuales cuentan con equipo de refrigeración. Manejar la humedad relativa por debajo del 50 % (Figura 30). b) El cuarto frío debe encenderse 45 minutos antes de ingresar el material biológico, en este tiempo debe alcanzar una temperatura de 2 a 3°C. c) Las cajas Parc son introducidas cuando la temperatura pre-regulada del cuarto frío baja de 2 a 3 °C. Estas permanecen dentro del cuarto frío durante 45 a 60 minutos. Al alcanzar el adulto un estado inactivo se golpean las cajas de manera tal que propicie la caída de la mosca al fondo y luego se sacan las bolsas de papel (Figura 31). Posteriormente se realiza la colecta de los adultos (Figura 32), los cuales se depositan en cajas de liberación según su capacidad, oscilando de 10.5 a 15 millones de adultos voladores, (Figura 33), La cantidad de cajas liberadoras a ensamblar dependerá del tipo de máquina liberadora. Para optimizar el tiempo de liberación, los vuelos deberán programarse con el resultado de 55 a 60 millones de pupas empacadas. Las cajas de liberación se enfriarán con anticipación y deberán colocarse las respectivas tapaderas en la base de estas, quedando listas para ser cargadas con el material biológico en estado inactivo.

6.2 Traslado del material biológico a la pista En el vehículo de transporte se enciende el sistema de enfriamiento Thermo-King, 30 minutos antes de ingresar las cajas liberadoras con el material biológico inactivo, una vez alcanzada la temperatura de 2 a 3°C, permaneciendo así hasta la pista de aviación. Las cajas liberadoras conteniendo los adultos inactivos son introducidas dentro de un furgón o camión (Figura 34) y son trasladadas a la pista (Figura 35)

6.3 Carga de material biológico a) Los aviones utilizados para este fin, son revisados con un día de anticipación y reportados como operativos y en buen funcionamiento por parte de una persona responsable. Es importante que los Centros de Empaque se encuentren cerca de las pistas o aeropuertos para que el tiempo de traslado del material biológico, no sea mayor de 25 a 30 minutos, evitando daños en el insecto por incremento a la exposición al frío. b) Las máquinas liberadoras se encuentran instaladas dentro de los aviones de liberación, son encendidas con 30 minutos de anticipación, por medio de corriente externa o se conectan directamente al avión al momento de instalarlas, para alcanzar una temperatura de 2 a 3°C. Se programa la velocidad de los tornillos sinfín o bandas según el caso, lo cual determina la densidad de liberación

requerida, de acuerdo a la programación en el caso de las máquinas enfriadas por compresor. En el caso de las máquinas enfriadas por CO2 el dato de la velocidad de salida de la mosca se programa previamente en la consola.

c) Se ingresan las cajas de liberación a las aeronaves (Figura 36) las cuales deben manejarse con cuidado, asegurándolas a la base del avión por medio de tensores (Figura 37) para evitar accidentes. d) Una vez instaladas las cajas de liberación y previamente retiradas las laminillas de la parte inferior, que permiten sellar las cajas evitando pérdida de material biológico, la máquina liberadora se regula a una temperatura de 2 a 3°C. 6.4 Traslado de la aeronave a bloques de liberación La aeronave cuenta con un sistema de localización vía satélite, lo cual permite programar la ruta y el patrón de vuelo, que el piloto seguirá para realizar la liberación con mayor presición. Así mismo permite identificar el punto donde se activaron y desactivaron los tornillos sinfín o las bandas de la máquina liberadora. 6.5 Liberación a) Por medio del monitor del sistema diferencial de posicionamiento geográfico satelital SDPGS/DGPS, (Figura 38), el piloto ubica la primera línea de vuelo, y para lograr un correcto recorrido en las líneas se auxiliará de la barra de luces (Figura 39), posteriormente procederá de acuerdo a la programación diaria entregada por el encargado de la liberación aérea a las tripulaciones. b) Al encontrarse ubicado en el punto del bloque se acciona el interruptor, para activar la máquina liberadora. La liberación se lleva a cabo a una altura entre 1000 y 2000 pies sobre el terreno, el tiempo de liberación depende de la cantidad de material biológico y número de líneas que realice a una velocidad de 127 a 160 millas náuticas o de 235 a 296 Km por hora, dependiendo del tipo de aeronave. Cada vuelo será impreso a fin de verificar su correcta ejecución, con sus respectivos datos técnicos de apoyo (Figura 40). Figura 38: Monitor del sistema diferencial de posicionamiento geográfico

c) Para la liberación aérea se utilizan los formatos siguientes: Programación de vuelos y control de densidades (Anexo I, Formato 4), y Programación general de liberación aérea (Anexo I, Formato 5). 6.6 Manejo y mantenimiento del equipo de liberación a) El equipo de liberación consta de un sistema de navegación aérea y máquinas liberadoras que se encuentran unidas a las cajas de tornillos sinfín o bandas, a las cuales se les acoplan las cajas liberadoras. b) El manejo y mantenimiento del sistema de navegación aérea lo realiza el técnico del departamento de informática quien es el responsable de que este equipo funcione perfectamente, así como también el diseño y rediseño de los bloques de liberación. c) El mantenimiento del equipo de liberación (compresores), cajas de tornillos sinfín o bandas, depósitos de CO2, está a cargo de un técnico capacitado, quien diariamente después de efectuar los vuelos de liberación, limpia el equipo de los residuos acumulados verificando el perfecto funcionamiento del equipo. 6.7 Liberación por la técnica de adulto frío con sistema de máquinas de enfriamiento por compresor. Se ha implementado la técnica de liberación de adulto frío en donde se utilizan aviones tipo Let UV 410 (Figura 41), los cuales tienen instalado en su interior una máquina liberadora (Figura 42), que es accionada a través de un interruptor que hace girar los

tornillos sin fin, que trasladan el material biológico hacia la puerta de salida. La máquina cuenta con varias velocidades accionadas por un control manual, utilizándose dependiendo de la densidad a obtener y el número de vuelos de cada bloque de liberación. a) Operación de las máquinas Las máquinas con sistema de enfriamiento por compresor constan de las siguientes partes: a.1. Compresor Es el equipo que contiene la unidad de refrigeración para enfriar a los insectos estériles. a.2. Tornillos sinfín Esta parte de la máquina liberadora es la que recibe a los insectos estériles de la caída de la caja y empuja las moscas de una manera controlada hacia la parte posterior de la unidad para la compuerta de salida de la mosca que al ser abiertas permite la salida de las moscas. El tornillo sinfín no funciona a menos que la compuerta este abierta. Dispone de ventilación lateral para evitar que la mosca se despierte. a.3. de Control Es la parte donde se coloca la velocidad de los tornillos sinfín para descargar los insectos estériles de la máquina liberadora. Aquí es donde la persona responsable lo utiliza para abrir o cerrar la compuerta de salida, iniciar o detener los tornillos sinfín. 6.8 Liberación por la técnica del adulto frío con sistema de máquina de enfriamiento de CO2. La máquina de liberación de insecto estéril funciona mediante el paso de gas frío de CO2 y sin humedad que se envía con el flujo de dos ventiladores. El primero se encarga de enviar el aire hacia las cajas liberadoras y el segundo ventilador se encarga de absorber el aire que entra a las cajas liberadoras para que se mantenga en circulación. a) Operación de las máquinas Las cajas de liberación están compuestas de 6 tolvas, donde va colocado el material biológico, dos pines: uno llamado central que permita alinear la caja en la base de la máquina para su rotación y otro llamado lateral que permite indicarle a la computadora mediante un censor que ya existe una caja en la base y que esta lista para liberar.

b) Las máquinas se componen de 4 computadoras (Drive Card) donde van colocadas

las cajas de liberación las cuales se encargan de testar, analizar y ordenar varios parámetros que van ligados al funcionamiento de las mismas como: la temperatura (en grados F) y el porcentaje de humedad relativa que se mantiene dentro de las cajas; censar si existe material en cada tolva de las cajas al momento de rotar, la velocidad que se ha indicado para rotación del tornillo sin fin, en que momento detenerse cuando esta dentro y fuera del bloque de liberación. Estas computadoras están conectadas a una consola que es la encargada de activar y desactivar automáticamente todo el funcionamiento de la máquina, la consola va conectada al sistema satelital AG-NAV. Dentro del bloque de liberación van programados dos parámetros importantes para el funcionamiento de la maquina:

1. La línea (36) que va indicado que se activen los tornillos de salida cuando la aeronave ingrese al y al salir de este que se desactiven o se paren los tornillos sin fin para detener la liberación. 2. La línea (63) donde va programada la velocidad de rotación de las aspas de salida según la densidad total a aplicar en el bloque.

6.9 Liberación con maquina de compresor y bandas de 50 cm de ancho. a) Descripción.- La máquina liberadora, diseñada para la liberación de insectos estériles bajo la técnica de adulto en frío, comprende una base fija montada sobre aviones tipo Cessna 401, 402 o similares, donde tiene un tablero con los comandos de operación durante el vuelo para calibración de velocidad de las bandas, visor de temperatura, humedad, sensor de descarga de moscas estériles y cámara de video para verificar la salida de moscas por el tubo de liberación. El otro componente es la plataforma sujeta al piso del avión con 2 bandas anchas de 30 cm, para cada una de las tres secciones de carga y descarga de cada una de las tres cajas especiales autónomas que contienen las moscas o insectos enfriados; una cámara de video a la salida del tubo de liberación y el tubo especial de liberación que tiene una pendiente de 300 de ángulo y tapas en el extremo accionadas mecánicamente para regular la succión del aire y que las moscas o insectos tengan una salida suave, sin choques bruscos con el viento o choques con el fuselaje del avión, (figura 44). Las cajas autónomas donde se depositan las moscas para la liberación son unidades

de refrigeración que una vez conectadas a la corriente eléctrica AC/ o alterna del avión producen y mantienen su propia refrigeración, manejando rangos bajos de temperatura de 0-5 0C y 50% de HR.

Capacidades e instrucciones de manejo.- La capacidad óptima de cada caja de liberación es de 15 millones de moscas adultas voladoras de la especie Ceratitis capitata, esto se debe a que la máquina requiere de un espacio de aire de 23 centímetros como mínimo para homogeneizar la temperatura y la reserva de oxigeno para las moscas. Es por esto que cada vuelo tiene una capacidad para manejar con eficiencia 45 millones de moscas estériles que equivalen a 60 millones de pupas con 75% de moscas voladoras. Cada caja está precalibrada a una temperatura de 1 grado centígrado y cuenta con un protector de retardo en caso de arranque en ciclo corto de 3 minutos. Cuenta además con un censor de temperatura y termostato digital. Por ser un equipo de refrigeración, la máquina nunca deberá rotar de su posición de trabajo. La parte posterior de la máquina deberá permanecer libre y separada de obstáculos para permitir la libre circulación de aire. Se deberá tener precaución con los cables de alimentación eléctrica. En caso de que se dañen, deberán ser reemplazados. b) Procedimiento de trabajo.- Las cajas autónomas de liberación deberán introducirse al cuarto frío donde están colectando las moscas enfriadas entre 2 y 3 grados centígrados y humedad relativa menor al 50%. Las moscas estériles enfriadas colectadas y cuantificadas se depositan en las cajas autónomas de liberación, teniendo cuidado de que durante el llenado no exista una compresión forzada del material biológico, por lo que no deberá ser golpeado, ni sacudido en ninguna de sus partes. La caja autónoma llena deberá conectarse a la energía eléctrica 110 V/AC y transportarla inmediatamente al avión. Para que cada caja autónoma se instale en el avión, debe fijarse y asegurarse al

dispositivo liberador o banda, luego debe conectarse al equipo inversor y encenderse, para esto, es recomendable también tener el motor del avión encendido ya que el gasto de baterías es alto. Una vez conectada y encendida la máquina, se retirará la compuerta de la parte inferior o piso falso de la caja autónoma para permitir que material biológico se deposite en las bandas liberadoras. El avión iniciara su procedimiento normal de despegue, y al llegar al polígono o bloque de liberación encenderá por turnos la banda o bandas de liberación previamente calibradas de acuerdo a la densidad de moscas por hectárea, convertidas a descarga del número de moscas por segundo o por minuto, según la fórmula internacional C/MAVZ. c) Calibración de la dosificaron de salida de las moscas estériles.- De acuerdo a los resultados de la formula internacional C/MAVZ, para las diferentes densidades manejar, las bandas de liberación deben ser fijadas en el tablero de control en la revolución alta, media o baja. Los apoyos adicionales de dosificar la salida de moscas por los tubos de liberación es ajustando la apertura de salida de las bandas hacia el tubo de liberación y accionando las tapas de regulación de la succión del aire por el tubo de salida. d) Limpieza de las cajas autónomas.- El interior de la maquina deberá ser limpiado cada ciclo con un paño húmedo y deberá permanecer abierta para no guardar humedad cuando no esté en uso. Para limpieza no deben ser retirados los tubos de acero inoxidable micro perforado y bajo ningún motivo deberá trabajar sin ellos. No moje la maquina bajo ninguna circunstancia. No utilice solventes. 6.10 Planes de vuelo Los planes de vuelo se formulan con un día de anticipación. Estos van de acuerdo con la estrategia general del programa, el avance de la cobertura semanal del bloque de liberación, la cantidad de material biológico para el día y las densidades pretendidas. Cada bloque se dividirá en líneas rectas paralelas, con separaciones de 250 metros numeradas, de tal manera que en el plan de vuelo se programen cubrir en semanas pares las líneas pares y en las semanas impares las líneas impares, realizando la liberación dos veces por semana, con líneas intercaladas quedando semanalmente líneas a 500 metros. La altura de vuelo será de 1,000 a 2,000 pies sobre el terreno. Los bloques de liberación para la erradicación de brotes (6,000 Ha) se liberarán una vez por semana. En el informe diario de liberación se registran, por orden de despegue, los vuelos realizados, la identificación del origen del material biológico y su destino, los cálculos de densidades obtenidas, las aeronaves utilizadas, tiempos de vuelo y pilotos, para llevar control del trabajo y la determinación de costos. 6.11 Fórmula para calibración de descarga de moscas estériles por unidad de tiempo. El tiempo efectivo de liberación y descarga de las moscas estériles estará determinado por la formula internacional publicada en el manual de la agencia internacional de la energía atómica AIEA-FAO:"Guidance for packing shipping, holding and release of sterile flies in area wide fruit fly control programmes". MAVZ = Moscas por segundo, donde M= numero de insectos a liberar por hectarea, A=ancho de cortina, V=velocidad del avión y Z=constante fija 0,0000278 MAVZ=Moscas por minuto, donde la constante fija es 0,001667

VII. LAVADO DE CAJAS PARC Y TORRES. Esta actividad se realiza después de efectuada la colecta del material biológico, trasladándose las cajas Parc de los cuartos fríos al área de lavado, se utiliza una máquina lavadora especial para cajas Parc, que funciona con motores eléctricos de 25 hp. La máquina realiza 4 etapas de lavado a cada caja y tapadera para optimizar la limpieza (Figura 45). En Centro de Empaque Tapachula se utilizan hidrolavadoras de alta presión (Figura 46).

7.1 Rendimiento Se ha estimado un rendimiento aproximado de 200 cajas Parc e igual número de tapaderas por persona, por hora, utilizando la lavadora manual a presión y un rendimiento de 300 cajas Parc y tapaderas por hora con la lavadora industrial. Luego de ser lavado este equipo de empaque de material biológico es trasladado al área de secado donde se colocan en forma de pirámide, de igual manera se procede con las tapaderas colocándose estas en unas carretas de metal fabricadas especialmente para ese uso. Posteriormente el equipo seco se traslada al área que se utiliza como bodega para

su almacenamiento para usarse seguidamente en la actividad de empaque. VIII. ESTRATEGIA GENERAL 8.1 Establecimiento de bloques de Liberación. a) Se establecerán bloques de liberación aérea con fines de erradicación sobre brotes que se encuentren activos en área libre y en área de baja prevalencia, en forma simultánea a los otros tratamientos de control. b) Se establecerán bloques de liberación aérea con fines de contención o un programa de liberación preventiva (PLP) en áreas de baja prevalencia, de acuerdo a la información histórica de la dispersión de la plaga sobre estás áreas. c) Se establecerán bloques de liberación aérea con fines de control de poblaciones suprimidas (debajo de 0.01 MTDF) en área de supresión, cuya función es disminuir la dispersión de la plaga hacia las áreas de baja prevalencia y libre. 8.2 Dimensiones de los bloques de liberación aérea. a) Bloques de erradicación.- Un bloque de liberación con fines de erradicación tendrá una superficie mínima de 6,000 hectáreas, será diseñado ubicando siempre el brote en el centro, en forma rectangular con medidas de 5 Km. de ancho. y 12 Km. de largo. Esto permitirá trazar las líneas de liberación a los aviones, para asegurar que la mayor parte de las moscas queden dentro del bloque. b) Bloques de contención (PLP).- Estos bloques tendrán superficies mayores, de acuerdo a la información histórica de la dispersión de la plaga sobre estás áreas. c) Bloques de control.- Estos bloques tendrán superficies mayores, de acuerdo a las superficies donde la plaga ha sido previamente suprimida a niveles debajo de 0.01 MTDF. 8.3 Densidades de Liberación a) Criterios ecológicos.- Para determinar la densidad de moscas estériles por hectárea (AV/Ha.) a liberar en cualquier bloque, se tomará en cuenta la caracterización del área, su agroecología, densidad de hospederos continuos o aislados, topografía quebrada o plana, altura sobre el nivel del mar, clima, y vientos dominantes. b) Criterios históricos de la plaga.- Si el brote activo corresponde a una o a varias capturas de la plaga en el presente ciclo. Si tiene antecedentes de plaga en años anteriores y los niveles. La relación estéril/fértil en la trampa que se estableció en ciclos anteriores y las densidades que se liberaron. c) Densidad en región con cultivo continuo (café).- La densidad a establecer fluctuará en un rango de 2,000 a 5,000 AV/ha, dependiendo de los criterios anteriores. d) Densidad en Región con cultivo aislado.- La densidad a establecer fluctuará en un rango de 1,500 a 2,000 AV/ha. dependiendo de los criterios anteriores. e) Escala en el rango de densidades programadas.- Las densidades a programar tendrán diferencias entre una y otra de 500 AV/ha. No se programarán fracciones de 500. 8.4 Inicio de liberaciones en un nuevo bloque de Liberación. a) Toma de decisión consensuada para áreas de supresión.- Los bloques deben ser diseñados y sometidos a consenso del grupo directivo y técnico regional durante la última semana de tratamiento con cebo-insecticida, con la finalidad de que las liberaciones de moscas estériles inicien en la siguiente semana. b) Adaptación del trampeo.- Al iniciar la liberación de las moscas estériles en un nuevo bloque, el trampeo de delimitación por km² será readecuado conforme al protocolo. 8.5 Periodo de liberaciones en un bloque de Liberación.

a) Definición del ciclo biológico.- Un ciclo biológico de la mosca del mediterráneo se medirá a través de los días grado que la plaga requiere acumular para completar un ciclo biológico. b) Criterio de ciclos biológicos.- En área libre y baja prevalencia, la liberación permanecerá mientras el brote este activo. 8.6 Continuación de liberaciones en un bloque de Liberación. a) En caso de acumulación de plaga en el periodo de los dos ciclos.- En caso de una acumulación de un macho fértil o una hembra fértil sí la relación estéril/fértil es de 10:1 se continuará la misma densidad de liberación; en caso contrario se debe incrementar la densidad en 500 adultos voladores por hectárea como mínimo o se valorará la aplicación de otros métodos de control para suprimir la plaga. 8.7 Parámetros de evaluación a) Distribución.- La distribución de las moscas estériles en los bloques de liberación, se medirá a través del porcentaje de trampas Jackson con moscas estériles del total de trampas Jackson revisadas. La meta semanal a alcanzar será del 95% en cada bloque; el valor mínimo aceptable es de 80%. b) Densidad.- La densidad de moscas capturadas se medirá a través del MTDE obtenido únicamente de las moscas capturadas en el total de las trampas Jackson revisadas y el número de días de exposición de esas mismas trampas. La meta semanal a alcanzar será de un MTDE mínimo de 1 (uno) por cada 1000 moscas liberadas /Ha. c) Precisión y Deriva.- La precisión y deriva de la liberación se medirá a través del total de moscas capturadas en todos los tipos de trampas revisadas, dentro y fuera de los bloques de liberación. La meta semanal a alcanzar de moscas estériles capturadas dentro cada bloque es del 95%; el valor mínimo aceptable es de 80%, incluyendo las moscas capturadas en un radio de 2 kilómetros alrededor del perímetro de cada bloque. La deriva fuera de los bloques de liberación compuesta por las moscas capturadas fuera de los 2 kilómetros de radio del perímetro de los bloques. Se debe descontar de la deriva las moscas capturadas alrededor de las pistas de carga de los aviones y de los centros de empaque y también por las moscas estériles capturadas que provengan de liberaciones terrestres. 8.8 Aclaraciones a) No se establecerán bloques de liberación aérea sobre una detección aislada que se encuentre en área libre o en área de baja prevalencia del programa regional. 8.9 Bloques de liberación de erradicación de brotes en área libre. La densidad a manejar son: de 1,500-2,000 mosca por hectárea en zonas costeras y/o hospederos dispersos y 2,000-5000 mosca por hectárea en zona cafetalera y/o hospederos continuos. El jefe del Centro de Operaciones de Campo a que corresponda el bloque de liberación, será el responsable de intervenir en el diseño y la solicitud de la suspensión del bloque de liberación una vez que se haya cumplido el período normado en este protocolo. 8.10 Bloques de liberación de contención permanente en área de baja prevalencia Es aquel que se establece de manera permanente en un área de baja prevalencia, a manera de barrera de contención, a fin de evitar que brotes y detecciones aisladas, alcancen categoría de área infestada. La densidad de moscas estériles por hectárea para los bloques de contención en área de baja prevalencia debe ser de 1,500 a 2,000 moscas por hectárea. 8.11 Bloques de liberación dinámicos en área de baja prevalencia Es aquel que se establece para asegurar el control de brotes aislados o prevenir su aparición,

pudiendo variar en forma, orientación, tamaño y duración de acuerdo a los criterios generales de este protocolo. La densidad de moscas estériles por hectárea para los bloques dinámicos en área de baja prevalencia debe ser de 1,500 a 2,000 moscas por hectárea. El jefe de Centro de Operaciones de Campo a que corresponda el bloque de liberación, será el responsable de solicitar la suspensión del bloque de liberación una vez se allá cumplido el periodo normado en este protocolo. 8.12 Bloques de liberación dinámicos en área de supresión Es aquel que se establece para asegurar el control de brotes aislados o prevenir su aparición, pudiendo variar en forma, orientación, tamaño y duración de acuerdo a los criterios generales de este protocolo. La densidad de moscas estériles por hectárea para los bloques dinámicos en área de supresión debe ser de 1,500 a 2,000 moscas por hectárea. El jefe de Centro de operaciones a que corresponda el bloque de liberación, será el responsable de solicitar la suspensión del bloque de liberación una vez que se haya cumplido el periodo normado en este protocolo. 8.13 Bloques de liberación post-supresión en áreas de supresión Es aquel que se establece después de haber suprimido altas poblaciones de la plaga y llevarlas a niveles de baja prevalencia, esto es, MTDF 0.01 Las densidades a manejar serán de 2000 a 5,000 moscas por hectárea en superficie con hospederos continuos y de 1500 a 2,000 moscas por hectárea en superficies con hospederos dispersos. La liberación se mantendrá en esa densidad, si ese parámetro de MTDF 0.01 de baja prevalencia no es rebasado en más del 25% de su superficie. Los brotes de la plaga que se ubiquen arriba del parámetro de MTDF 0.01 dentro del bloque deberán asperjarse en forma aérea o terrestre para que las moscas estériles sean eficaces. La relación estéril: fértil de 10:1 detectada en las trampas es la mínima competitiva. Si el bloque es rebasado por la plaga en más del 25% de su superficie arriba del parámetro de baja prevalencia y la relación estéril: fértil es desfavorable, se declarará bloque o área infestada y se dejara de liberar moscas estériles. En este caso se tiene que asperjar en forma aérea toda la superficie del bloque antes de volver a liberar moscas estériles. IX. PRUEBAS DE CONTROL DE CALIDAD. 9.1 Pruebas de control de calidad pre-enfriamiento – Referidas al manual de Control de Calidad de la AIEA 2003. a) Corroboración del peso de la pupa para determinar la medida volumétrica de pupas a empacar. b) Determinación de la edad de la pupa (coloración de ojos). c) Habilidad de vuelo de Laboratorio. d) Tiempo de emergencia del 50% de adultos. e) Proporción sexual. f) Prueba de longevidad bajo tensión oscuridad. 9.2 Pruebas de control de calidad post-enfriamiento a) Voladoras absolutas. b) Longevidad con agua y sin agua. 9.3 Prueba de Voladoras Absolutas Objetivo Determinar las pérdidas o daño ocasionado al material biológico por efectos del enfriamiento a que son sometidas durante el proceso de colecta y así mismo obtener el porcentaje de voladoras absolutas para determinar las densidades de adulto volador liberado. a) Materiales y Equipo Caja Petri para el peso por gramo, vaso de precipitado de 1 litro, pupa por mezclada o colecta,

engrapadora, balanza analítica, grapas, lapiceros, tamiz, bolsas de papel kraft, calculadora, espátula, cinta adhesiva, cremeros, marcador para identificar, cajas parc, porciones de dieta de agar y/o dieta seca, talco industrial, brocha de 2 pulgadas de ancho, papel parafinado (de la misma medida de la dieta), pitas para su amarre y formatos para registro. b) Metodología Inicio de la prueba Pesar el número de bolsas a utilizar y registrar el promedio de dichos pesos. Por ejemplo: Peso de cada bolsa =15.50 gramos aprox. Peso de las seis bolsas 93.0 (el peso de las bolsas es variable). Pupas por gramo: Se limpia la pupa a ser utilizada por medio de un tamizado. Seguidamente pesar un gramo y contar el número de pupas; realizar tres repeticiones de un gramo y el resultado es el promedio de los conteos. Este procedimiento es por envío lote y colecta. Por ejemplo: 133 + 132 + 133 = 398 /3= 133 pupas/g (peso en limpio) Se coloca la medida en seis bolsas de papel kraft de 7,500 pupas lo que equivale a 45,000 pupas por caja (esta cantidad se divide entre el número de pupas por gramo) el resultado será el peso de la medida a colocar en cada bolsa. Por ejemplo Por bolsa 7500/133 = 56.39 gramos Por caja 45,000/133 = 338.34 gramos Este resultado (338.34 gramos) nos indica la medida para las pruebas de tratamiento de normal y frío, las mismas son identificadas de la siguiente manera: número de envío, lote colecta y fecha de recepción. Se coloca una grapa en el centro de las bolsas dejando únicamente dos espacios laterales para que pueda salir el insecto. En el espacio de la tapadera diseñado para este fin se coloca una porción de dieta de agar (gelatinosa) para su alimentación y en la parte superior de la porción de dieta el papel parafinado. Luego se les coloca pita con ganchos para un amarre seguro y se les traslada a la sala de emergencia hasta el día en que el material es liberado. Estas salas se encuentran a una temperatura mínima de 21°C y una máxima de 23°C. Registro del formato de Voladoras Absolutas: NORMAL Y FRIO. Nombre de la cepa Envío Lote Mezclada (colecta) Fecha Liberación Pupas por kilogramo: (133,000) = se multiplica el promedio por 1,000 Peso pupa: (1 / 133) 1,000 = 7.51 mg Peso adulto: 7.51 x 0.9 = 6.76 mg No. de gramos/caja: Este resultado se obtiene de multiplicar 56.39 por 6 bolsas que contiene cada caja. 9.4 Liberación a) Metodología El día que ha sido programada su liberación se separa la prueba de tratamiento, la cual es introducida al cuarto frío a una temperatura promedio de inicio de –3° mínimo y un máximo de 2 - 3 °C aproximadamente durante 45 minutos a 60 minutos Posteriormente se vacía el contenido de las 6 bolsas tanto de la caja con tratamiento normal como la del frío en una charola plástica color negro (antes se le aplica talco industrial para evitar que se escapen las moscas no voladoras) y permitir escapar al insecto volador. Al completar la

liberación, se vierten los residuos en una bolsa de papel kraft para ser pesados. Estas liberaciones se realizan aproximadamente a las 6:00 de la mañana en adelante (siempre y cuando exista claridad para motivar a la mosca). Seguidamente se introduce a una temperatura de 0 °C con la finalidad de dormirla y facilite el peso de residuo en la balanza analítica (se vacía en un vaso de 1 litro). b) Cálculo del Porcentaje de Voladoras Calculo de la diferencia A - B Gramos pupa / caja - peso residuo Normal 413.53 - 142.24 = 271.29 Frío 413.53 - 152.27 = 261.26 Porcentaje de voladoras Diferencia de Normal- frío (1000)/peso adulto/No. Pupas/caja (x) 100 = Normal 271.29 (1000) / 6.77 / 55,000 (100) = 72.86 Frío 261.26 (1000) / 6.77 / 55,000 (100) = 70.17 Perdida Es la diferencia del % de voladoras normal y frío 72.86 - 70.17 = 2.69 9.5 Longevidad de adulto frío Objetivo Determinar el tiempo que viven el 50% de las moscas después de su tratamiento frío, con disponibilidad de agua y sin agua. a) Materiales y Equipo Jaula pequeña de plexiglás (grosor de 0.5 cm, con dimensiones de 21 x 21 x 21 cm y un agujero de 10 cm de diámetro en la parte superior cubierto con un cedazo plástico y un agujero de 15 cm de diámetro en la parte frontal). Manguera plástica (para colocar en el círculo de la caja plexiglás). Tela de tul (para hacer mangas). Tubo succionador con pipeta. Termómetro. Vasos plásticos de 0.5 litro (con orificio en la parte superior extrema). Cinta adhesiva. Frascos entomológicos. Azafates. Hules (para colocar en vasos). Algodón común. Algodón dental. Agua destilada. Estantería tubos fluorescentes de 20 watts. b) Metodología Al quinto día de su tratamiento frío (liberación) se procede a colectar una muestra aproximadamente 600 adultos, transfiriéndolos a una caja plexiglas. Se realizan 5 repeticiones identificados cada uno con No. de envió, lote, colecta, fecha y la hora de introducirlas. Se preparan en un azafate 5 repeticiones con 30 moscas (vaso 0.5 litro). Con agua Se perfora el orificio de cada vaso de medio litro a un costado sellando con cinta adhesiva (lado superficial) y se cubre con una malla que tiene las siguientes medidas: 2 cm de abertura para no obstaculizar el ingreso de la mosca, y se sujeta la malla con hule, seguidamente se introduce el frasco entomológico (contiene agua destilada y algodón dental el cual le permitirá ingerirla). Sin agua

Es el mismo procedimiento a excepción de que se le coloca en el orificio algodón común y sin agua. Estas pruebas son trasladadas a la sala de prueba con condiciones de temperatura mínima de 24 °C y un % 60 a 70 H.R. Después de 8 horas se registra la primera lectura hasta obtener un 50 % de mortalidad. Cada período de lectura se realizará a cada 6 horas. Para calcular el tiempo de vida - Se colocan los promedios en una hoja milimetrada indicando la hora y los porcentajes, se grafica para conocer la hora en que se obtuvo 50% de mortalidad, como referencia se toma la hora de inicio de la succión del material biológico y la diferencia será el número de horas de ciclo de vida. 100

FORMATOS DE RECEPCION, MANEJO Y LIBERACION DE MOSCA DEL MEDITERRANEO ANEXO 1 FORMATO 1 CENTRO DE EMPAQUE RETALHULEU CONTROL DE TEMPERATURA PARA LA RECEPCIÓN DE PUPA

ANEXO 1 FORMATO 2 CENTRO DE EMPAQUE RETALHULEU RECEPCIÓN Y EMPAQUE

ANEXO 1 FORMATO 3 CENTRO DE EMPAQUE RETALHULEU CONTROL DE TEMPERATURA Y HUMEDAD RELATIV

ANEXO 1 FORMATO 4 CENTRO DE EMPAQUE RETALHULEU PROGRAMACIÓN DE VUELOS Y CONTROL DE DENSIDADES

ANEXO 1 FORMATO 5 CENTRO DE EMPAQUE RETALHULEU PROGRAMACIÓN GENERAL DE LIBERACIÓN AÉREA

ANEXO I FORMATO 6 UNIDAD MOSCA DEL MEDITERRANEO LABORATORIO DE CONTROL DE CALIDAD DEL PRODUCTO CEAF TAPACHULA

RECUPERACION VOLADORAS ABSOLUTAS ( % ) ADULTO FRIO

ANEXO I FORMATO 7 UNIDAD MOSCA DEL MEDITERRANEO LABORATORIO DE CONTROL DE CALIDAD DEL PRODUCTO CEAF TAPACHULA

RECEPCION DE LA PUPA

Unidad de Control Integrado de la Subdirección de Moscas de la Fruta y Proyectos Fitosanitarios Es la encargada de planificar, organizar, ejecutar y supervisar las actividades nacionales de control orientadas a la erradicación de moscas de la fruta en los distintos cultivos hospedantes, con la finalidad de suprimir la plaga en una primera etapa y consolidarla con la erradicación en una segunda etapa de trabajo. Finalidad: Controlar, contener, suprimir y/o erradicar la plaga moscas de la fruta de importancia económica. Reducir las pérdidas económicas ocasionadas por la plaga en las zonas de acción donde se implantan programas oficiales de control y/o erradicación de la plaga moscas de la fruta. Sistema Nacional de Control Integrado Proceso oficial que se sustenta en el conocimiento de la biología, morfología, comportamiento y ecología de la plaga, se soporta en la información que se obtiene del Sistema de Vigilancia de moscas de la fruta, donde se identifica el momento oportuno para iniciar actividades de control de la plaga. Los procedimientos utilizados para el control integrado de moscas de la fruta son principalmente el control Cultural- Mecánico, Químico, Autocida (Técnica del Insecto Estéril- TIE) y Legal. 1. ¿Qué es el control integrado? Es un sistema de control de plagas, que utiliza las técnicas y métodos disponibles que no afectan al ambiente, con la finalidad de reducir las poblaciones de las plagas, con las siguientes características: La plaga no cause daño económico. Se aplica por productor individualmente. Se aplica en cultivos de importancia económica. Se aplica periódicamente. 2. Tipos de Control Mecánico – Cultural: Parte fundamental dentro de las actividades comprendidas en el Control Integrado de moscas de la fruta, es una práctica sencilla, y cuando se ejecuta constantemente evita las condiciones favorables para el desarrollo de la mosca de la fruta. Dentro de las actividades de control mecánico – cultural de las moscas de la fruta podemos citar:

Recojo y entierro de frutos

Rastrillado de suelos

Podas de sanidad

Periodo de campo limpio

Control Químico: Este método reduce de manera rápida y drástica a las poblaciones de la moscas de la fruta mediante el uso de productos químicos. Es importante tomar en cuenta el momento oportuno para aplicar este tipo de control. Para el control químico de moscas de la fruta se utilizan: Cual se alimenta la mosca. Menor impacto sobre los enemigos naturales. Cebo Tóxico: Es la mezcla de insecticida, atrayente alimenticio (proteína hidrolizada) y agua; que es asperjado focalizadamente al follaje de los frutales. También existen productos que solo son mezclados con agua. El atrayente alimenticio utilizado incrementa la efectividad de la aplicación y disminuyendo la cantidad de insecticida a usar. Las gotas del Cebo Tóxico son de más atracción para las moscas de la fruta que las secreciones de afidos, escamas y mielecilla de la cual se alimenta la mosca. Control Etológico: Es la utilización de técnicas de captura de insectos plaga, mediante las cuales se aprovecha el comportamiento y hábitos de vida del insecto para su control. Para el caso de moscas de la fruta se aprovechan los hábitos alimenticios que estas poseen, especialmente de hembras que ingieren sustancias ricas en proteínas y sienten atracción hacia sustancias nitrogenadas – amoniacales. Desde el punto de vista práctico, las aplicaciones del control etológico incluyen la utilización de atrayentes sexuales, alimenticios y atrayentes visuales en trampas. Control Biológico: Es la represión de las plagas mediante sus enemigos naturales; es decir mediante la acción de predadores, parásitos y patógenos. Los parásitos de las plagas, llamados también parasitoides, son insectos que viven a expensas de otro insecto (hospedero) al que devoran progresivamente hasta causarle la

muerte. Durante ese tiempo completan su propio desarrollo larval. Los predadores son insectos u otros .animales que causan la muerte de las plagas (víctimas opresas) en forma más o menos rápida. Control Autocida (Técnica del Insecto Estéril -TIE): Consiste en la cría y esterilización de un gran número de machos de mosca de la fruta, para ser liberados en campo, a fin de reducir la capacidad de reproducción de las hembras silvestres.

Control Legal: El control legal son disposiciones obligatorias (leyes o reglamentos), que emite el gobierno para garantizar la participación de la población a fin de evitar el ingreso de la mosca de la fruta a una determinada área. Además se considera: La implementación y aplicación del Reglamento para el Control, Supresión y Erradicación de Moscas de la Fruta, Decreto Supremo Nº 009-2000-AG. Proteger las áreas reglamentadas mediante la instalación de Puestos de Control de atrayentes sexuales, alimenticios y atrayentes visuales en trampas.

PRODUCCION DE MOSCA ESTERIL La producción masiva estéril de Mosca del Mediterráneo Ceratitis capitata Wied. es fundamental para el control y la erradicación de la Mosca de la Fruta de esta especie; este sistema es conocido como control Autocida o Técnica del Insecto Estéril (TIE), el cual consiste en utilizar a la Mosca del Mediterráneo para combatir a su propia especie aprovechando los encuentros (cópulas), entre hembras y machos. Al liberar una mayor cantidad de mosca macho estéril producidos en relación a la cantidad de plaga de esta especie existe en las áreas de campo bajo control se produce como resultado una reducción de la probabilidad de encuentros entre machos y hembras silvestres. La Técnica del Insecto Estéril de esta plaga consiste que la mosca macho estéril producidos en la Planta se aparean con hembras silvestres y se produce como resultado de este cruce huevecillos infértiles, reduciendo de esta manera la población de la plaga en su siguiente generación y por lo tanto se evita el daño producido por las larvas o gusanos en las frutas de consumo humano. En la Planta El Pino, situada en el departamento de Santa Rosa se produce masivamente este insecto por medio de técnicas que se han desarrollando a través de años de investigación y desarrollo de

métodos, los cuales han hecho que “El Pino” esté a la vanguardia a nivel mundial en la cría masiva de la Mosca del Mediterráneo, lo que ha atraído a técnicos de varios países que cuentan con plantas similares, para capacitarse, además desde hace tres años se cuenta con la Certificación ISO 9001.

PLANTA DE MOSCA DEL MEDITERRANEO ESTERIL, EL PINO, BARBERENA, SANTA ROSA, GUATEMALA

Actualmente se producen 1,200 millones de pupa estéril por semana y aunque la planta tiene la capacidad de producir tres veces esta cantidad la producción es una cepa de sexado genético en la cual las hembras son sensibles a la temperatura y son eliminadas por alta temperatura en estado de huevo, garantizando que son solamente machos los que se liberarán en el campo. Así mismo se producen y se envían a la Planta de Producción en México más de 100 litros de huevo semanales, que equivalen a más de 600 millones de pupa.

BIOLOGÍA DE LA MOSCA DEL MEDITERRANEO (Ceratitis capitata): 1. La hembra y el macho fértiles copulan y la hembra produce huevos. 2. Los huevos se desarrollan a larvas o “gusanos”, que van aumentando gradualmente de tamaño.

3. Al final de su desarrollo, cada larva se transforma en una pupa y 4. Los adultos emergen de la pupa y continúan su ciclo, copulando y produciendo huevos para la siguiente generación.

La planta El Pino para la producción masiva de insectos cuenta con varios procesos: 









Elaboración de dietas: En donde se fabrica diariamente varias toneladas de dieta larval para las colonias y está compuesta por ingredientes que aportan proteínas, grasas, aminoácidos y carbohidratos necesarios para el desarrollo de las larvas y también fabrica alimento para insectos adultos. Filtrado Genético: El proceso de producción se inicia con el filtro genético tiene como objetivo mantener la pureza de la cepa de sexado genético y el inicio de la magnificación de las colonias, corresponde al pié de cría. Este aspecto es muy importante debido a que la característica principal de esta producción es que la cepa utilizada permite identificar, antes de su emergencia, a los machos y a las hembras. Reproductores de Colonias: En este proceso se encuentran los adultos fértiles en jaulas que producen el huevo necesario para el mantenimiento de las colonias y asimismo se produce el huevo que se llevará a un proceso de tratamiento térmico en donde se eliminan las hembras aplicando temperaturas de 34 grados centigrados. Cría Larval de Colonias: Consiste en el desarrollo y magnificación de machos y hembras a lo largo de cuatro generaciones. Es el proceso encargado de aumentar la cantidad de insectos, su función es proporcionar hembras y machos fértiles para la producción de huevo. Los individuos que se originan de esta colonia sirven para las otras tres colonias: la de iniciación, inyección y liberación. Cría Larval Machos térmicos: Los huevos producidos por la colonia de liberación son sometidos a un tratamiento térmico que tiene como fin eliminar a las hembras sensibles a la temperatura y con esto lograr producir únicamente machos, es tratado térmicamente por un término de 12 horas, los huevecillos son sumergidos a 34 grados centígrados. Solo sobrevivirán los embriones que darán lugar a machos, porque las hembras no soportan estas temperaturas. El huevo sobreviviente es sembrado en dieta larval, para permitir el crecimiento de larvas macho, las cuales aprovechan al máximo este alimento durante 5 días y posteriormente se convierten en pupas que maduran lentamente a bajas temperaturas durante 12 días hasta alcanzar la edad necesaria.



Irradiación, Empaque y Despacho: El proceso de esterilización es llevado a cabo por personal altamente calificado para el efecto. Las pupas macho se seleccionan cuando faltan 48 horas para su emergencia como adulto, entonces son marcadas con colorante fluorescente son codificadas e identificadas con una calcomanía (filmina), éstas se colocan dentro de irradiadores con fuerte sellado y almacenamiento en seco que irradian rayos gama y son seguros para los técnicos que los operan pues se encuentran dentro de una cápsula de plomo, cuando la calcomanía (filmina) cambia su color a negro debido al efecto de la dosis de radiación, lo cual indica que ha pasado por este proceso de Irradiación, y están listas para ser empacadas y enviadas a su destino final.

Secretaría de Agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación

Ministerio de Agricultura, Ganadería y Alimentación

United States Department of Agriculture