Melampsoridium-alni 5i2k5o

HYO-PERU 2018

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE

AGRADECIMIENTOS

El estudio brinda a distintas formas de vida, cuando alguien posee conocimientos, le resulta más fácil desempeñarse en su actividad laboral, obteniendo grandes perspectivas de la vida .El estudio es una manera de ampliar los horizontes, que se puede recorrer durante el largo de la vida del hombre. Las herramientas de estudio más valiosas que nos enseñaron los ingenieros del curso de Patología Forestal, fueron importantes para el desarrollo del presente trabajo.

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INDICE

RESUMEN ....................................................................................................................... 5 I.

INTRODUCCIÓN .................................................................................................... 6

II.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .............................................................. 7

III.

RESVISION DE LITERATURA .......................................................................... 7

3.1.

ANTECEDENTES ................................................................................................ 7

3.2.

ANTECEDENTES DEL PROBLEMA INVESTIGAR...................................... 10

3.3.

JUSTIFICACION DE LA INVESTIGACION ................................................... 11

MARCO TEORICO ....................................................................................................... 12 3.4.

BASES TEÓRICAS ............................................................................................ 12

3.4.1

PATÓGENO ................................................................................................ 12

3.4.2

ESPECIE FORESTAL HOSPEDERA Alnus acuminata ............................ 22

3.5.

SIGNOS Y SINTOMAS ..................................................................................... 29

3.8

MEDICION DEL PATÓGENO .......................................................................... 33

3.9

TAXONOMIA JERARQUICA DEL PATOGENO ........................................... 34

3

MATERIALES Y MÉTODOS ............................................................................... 36

3.6

LUGAR DE EJECUCION ................................................................................. 36

3.7

MATERIALES Y MÉTODOS............................................................................ 37

3.8

METODOLOGÍA ................................................................................................ 38

3.8.2

Diseño de la investigación ............................................................................... 38

3.8.3

Población y muestra ......................................................................................... 38

3.8.4

Variables de investigación ............................................................................... 38

3.8.5

Técnica de colecta de datos ............................................................................. 38

4

RESULTADOS Y DISCUSIÓN ............................................................................. 40

5

CONCLUSIONES .................................................................................................. 44

6

RECOMENDACIONES ......................................................................................... 44

7

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA ........................................................................ 44

8

ANEXOS ................................................................................................................. 46

3

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE CONTENIDO DE TABLAS Tabla 1: ................................. 15 Tabla 2: ........................24 Tabla 3: .................................30 Tabla 4: ..................................30 CONTENIDO DE GRAFICOS Gráfico 1: ...................25 Gráfico 2: ..................................................25 CONTENIDO DE FIGURAS Figura1: ..................................................16 Figura 2: .....................................................................16 Figura 3: .....................17 Figura 4: .........................23 Figura 5:...........................................................31 Figura 6:....34 Figura 7:....................................34 Figura 8:........................35 CONTENIDO DE FOTOGRAFIAS Fotografía 1:..........................................41 Fotografía 2:........................................41 Fotografía 3:...........42 Fotografía 4: ………………..42 Fotografía 5:………………….....43 Fotografía 6:....................43 4

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Fotografía 7:.44 Fotografía 8: ......................44 Fotografía 9: .......................................45 Fotografía 10: ............................45 Fotografía 11: .................46 Fotografía 12: ..............................................46 Fotografía 13: ........................47 Fotografía 14: .............................47 RESUMEN

El presente trabajo titulado estudio del patógeno Melampsoridium alni, causante de la roya en el Alnus acuminata, tuvo como objetivo caracterizar la morfología de los Puccinales, los signos y síntomas que causa el hongo Melampsoridium alni en el Alnus acuminata, evaluar el daño que causa la roya del Melampsoridium alni en el Alnus acuminata y proponer técnicas de manejo para el control del patógeno Melampsoridium alni. Las muestras fueron recolectadas en el Distrito de Huayucachi. Se describió la morfología de los Pucciniales .En el laboratorio se evaluó los signos y síntomas de las muestras colectadas. Consecuentemente se describió los síntomas que manifestó el Alnus acuminata atacada por el Melampsoridium alni. Los resultados muestran que el Melampsoridium se manifiesta como puntos o manchas de un polvillo amarillo, las cuales presentan esporas denominadas urediniosporas, que son producidas en grandes cantidades y corresponden al polvillo amarillo que se visualiza en el envés de las hojas del Alnus son unicelulares y físicamente tienen una forma ovalada como pequeños huevecillos de 30u de largo y 20u de ancho aproximadamente.

Palabras claves: Pucciniales, Alnus acuminata, Melampsoridium alni

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I.

INTRODUCCIÓN

El “Aliso “Alnus acuminata, es una especie endémica de la sierra peruana. Según DS N° 043-2006-AG sobre la clasificación oficial de especies amenazadas en el Perú, esta especie se encuentra en estado vulnerable, debido a la gran de tasa de deforestación. Cumple un rol muy importante en la naturaleza ya que fija el nitrógeno en el suelo y lo fertiliza de modo natural. También una de las cualidades de esta especie, el Alnus acuminada tiene beneficios en la recuperación y restauración de suelos. acuminata

El Alnus

está siendo atacada por el patógeno fúngico Melampsoridium alni, por el

severo ataque ocasiona la aparición pústulas de color naranja en las hojas y su posterior caída. La investigación tiene por objetivo caracterizar la morfología de los puccinales, los signos y síntomas que causa el hongo Melampsoridium alni en el Alnus acuminata, evaluar el daño que causa la roya del Melampsoridium alni en el Alnus acuminata y proponer técnicas de manejo para el control del patógeno Melampsoridium alni.

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II.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA 2.1. PROBLEMA GENERAL

¿Cómo afecta la roya Melampsoridium alni en la especie Alnus acuminata en el aspecto económico, social, ambiental y ecológico? 2.2. PROBLEMAS ESPECIFICOS



¿Cómo es la morfología de los Pucciniales en el Alnus acuminata?



¿Cuáles son los signos y síntomas

causadas por el patógeno

Melampsoridium alni que presenta el Alnus acuminata?

III.

RESVISION DE LITERATURA 3.1.

ANTECEDENTES

 Serta H. B., Sümbül H. (2005) Primer reporte de Melampsoridium hiratsukanum en Alnus orientalis var. orientalis en Turquia. En el período de 1999 y 2001, en la provincia de Anatolia Meridional en Antalya, se observaron uredinia en las hojas y frutos de Alnus orientalis var. orientalis. Los soros, que se produjo en el 7

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE envés de las hojas, tenía 3-5 mm de diámetro y era de color amarillo anaranjado y en el examen microscópico reveló urediniosporas echinuladas uniformemente, midiendo 21-35 × 10-16 μm. Se han descrito dos especies de Melampsoridium en los Alisos, uno que es el Melampsoridium alni, y el M. hiratsukanum. Finalmente se describe que el Melampsoridium alni es muy similar morfológicamente a la roya del M. betulinum. donde M. hiratsukanum es morfológicamente distinguible de los dos (Szabo, 2002), Siendo este reporte el primer especifico de infección en Alnus orientalis var. orientalis.  Mc Kenzie EHC 1, Padamsee, M. Dick, M.(2013) En “El primer reporte de hongo en Alnus en Nueva Zelanda, Melampsoridium betulinum, no M. hiratsukanum”, se observó por primera vez la enfermedad de la roya en las hojas del Alnus viridis en Canterbury en 1980, luego en Alnus spp. en Nelson en 1990 y en Auckland en 2012. El agente causal se determinó mediante técnicas moleculares dando resultados de que era Melampsoridium betulinum y no M. hiratsukanum. Ademas se detallan tres tipos de hongos: Melampsoridium Alni, M. betulinum y el M. hiratsukanum. Morfologicamente las tres royas son bastante similares sin embargo las urediniosporas de M. alni tienen un único poro germinal polar en cada extremo, lo que las distingue de M. betulinum y M. hiratsukanum, que tienen 2-3 poros germinales cerca de cada extremo de la espora.  Gortari, F. (2015) Mecanismos fisiológicos que determinan la merma de crecimiento de Populus deltoides infectado por roya Melampsora medusae. Las alteraciones que produce la asociación del patógeno y el hospedante se estudiaron en variables como altura, diámetro y biomasa de la planta, en el que que se determinó que los síntomas fueron la reducción en el crecimiento de la planta, debido a la fisiología anormal de las hojas. Esta melampsora medusae se presenta como manchas pequeñas o puntos cloróticos - amarillentos, manchas de hipersensibilidad - en el haz y, en correspondencia con éstas, en el envés de las hojas, se presentan los uredosoros de las uredosporas que son unicelulares pediceladas, con episporio espinulescente, amarillas y acompañadas siempre de paráfisis más o menos clavuladas y hialinas que las sobrepasan en altura.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE  Roll-Hansen, Roll-Hansen, H. (1981) Melampsoridium en Alnus en Europa. M. alni conespecífica con M. betulinum. Mencionan sobre la conspiración que tiene el Melampsoridium alni y el M. betulinum, diferenciándola del M. hiratsukanum Refiriéndose que las especies de Melampsoridium en huéspedes de Alnus han sido reportadas en Finlandia, Italia y Escocia. Las descripciones de M. alni dadas de células ostiolares y el tamaño y la echinulación de las urediniosporas se ajusta al del M. betulinum. Siendo diferente el M. betulinum (M. alni)(Fig.7 -8) al M. hiratsukanum,(Fig.9) que tiene urediniosporas echinuladas en toda la superficie.

 Además el diámetro de las uredinias de las especies de Alnus, son más pequeñas que en las especies de Betula, que van de un 0.1-0.5 mm en las diferentes especies de Alnus.  Szabo I (2002) En Hungría, octubre 2001. Se observó una epidemia de roya de la hoja de Alnus glutinosa en algunos de los viveros de la parte sur de ese país. Esta enfermedad de la roya del aliso era desconocida en ese país. Dos especies de Melampsoridium fueron descritas en el aliso, M. alni y M. hiratsukanum. Las muestras de óxido de aliso recogido en Hungría fueron uniformemente evaluadas y comparadas directamente con muestras de M. betulium. Los urdiosporas del aliso fueron 21-33 x 9-15 um longitud de las células ostiolar del uridinios 42-53 um correspondiente a las descripciones morfológicas de M. hiratsukanum. Las urdiosporas de la roya del abedul eran lisas al extremo superior redondeado, 25-34x10-15um el espesor de la episopórium, 1,5- 2m.

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE 3.2.

ANTECEDENTES DEL PROBLEMA INVESTIGAR

 Arguedas & Espinoza (2007) En el artículo “Problemas fitosanitarios del jaúl (Alnus acuminata Kunth) en Costa Rica”. En el que se reportan 57 agentes causales que provocan daños a dicha especie por lo cual son 13 patógenos (22.8%). Siendo el de mayor impacto en el follaje, la roya Melampsoridium alni conocido como “roya del jaúl” En la mayoría de las plantaciones del país se presenta

una

serie

de

manchas

pardo

amarillentas

producidas

por

Melampsoridium alni. Al inicio del ataque se presentan manchas irregulares color amarillo en el envés de las hojas, posteriormente, éstas pueden colapsar y formar áreas necróticas extensivas color pardo oscuro en ambos lados de la lámina foliar. Cuando el hongo madura, puede atacar tantas láminas foliares como ramillas jóvenes y yemas.  SENASA (2008) Las royas en la especie Alnus acuminata el distrito de Santa Rosa de Ocopa, Concepción, Junín, las síntomas que presentan son pústulas presentes en el envés de las hojas. Melampsoridium sp. Es un parasito obligado, por lo que no crece en medios de cultivo. De los diferentes tipos de esporas que presenta, se observó en pústulas sub-epidermales, masas amarillentas a anaranjadas de uredosporas saliendo de una abertura o poro. Las uredosporas son unicelulares, con pares ornamentadas tipo equinulada y hialinas  Reátegui Moscoso (2010) En su tesis “Prospección de las plagas del "aliso" (Alnus acuminata H.B.K.) y la "guinda"(Prunus serotina Ehrh.) en el valle del río Mantaro” Estudió los agentes biológicos que atacan al Alnus acuminata en el cual menciona al barrenador del fuste Eurysthea sordilla, y tres especies que se alimentan de las hojas: la Cigarrita Empoasca sp., la roya causada por el hongo Melampsoridium sp., y la mancha foliar del hongo Bactrodesmium sp. En estudio se presenta los siguientes resultados:  Los síntomas del daño de Melampsoridiun sp. son pústulas anaranjadas a ligeramente amarillentas, y algunas veces rojizas, situadas en el envés de las hojas de Alnus acuminata.

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 Los signos observados en laboratorio: De los diferentes tipos de esporas que presenta, se observó en pústulas sub-epidermales masas amarillentas a anaranjadas de uredosporas saliendo de una abertura o poro. Las uredosporas son unicelulares, con paredes ornamentadas tipo equinulada y hialinas.

3.3.

JUSTIFICACION DE LA INVESTIGACION

 La presente investigación se enfocará en estudiar al hongo patógeno Melampsoridium alni el cual es causante de la roya en la especie Alnus acuminata, este patógeno representa un problema fitosanitario de interés económico y ecológico por lo cual es de gran importancia el análisis y tratado.  Este estudio nos ayudara a comprender y conocer mejor los procesos, ciclo, morfología, los signos y síntomas que causa el hongo para así

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE formular medidas de control y evitar crisis ecológicas así también como pérdidas económicas.

MARCO TEORICO

3.4.

BASES TEÓRICAS

3.4.1

PATÓGENO

3.4.1.1 DEFINICIÓN DE AGENTE PATÓGENO

Según (Agrios, Fitopatología, 2008) el agente patógeno es el causante de la enfermedad infecciosa o algún daño en un organismo hospedero.

3.4.1.2 DEFINICION DE ENFERMEDAD

Según (Agrios, Plant Pathology. 5th ed. Academic Press. Burlington, US. , 2005) una enfermedad en las plantas se define como el mal funcionamiento de las células y tejidos del hospedante la cual provoca una alteración fisiológica debido al efecto continuo sobre estos últimos a causa de un organismo patógeno o factor ambiental que origina la aparición de los síntomas. Se manifiesta que los procesos específicos que caracterizan las enfermedades, varían considerablemente según el agente causal y en algunos casos según la planta misma. En un principio, la reacción de la planta ante el agente que ocasiona su enfermedad se concentra en la zona enferma y es de naturaleza química e invisible, la planta activa sus mecanismos de defensa ante él patógeno. Sin embargo, poco tiempo después la reacción se difunde y se producen cambios histológicos que se hacen notables y constituyen los síntomas de la enfermedad. 12


Así mismo la FAO (2006), menciona que los cambios anormales en la forma, fisiología, integridad o conducta del árbol son debido al ataque de un patógeno o a la acción de los factores ambientales.

3.4.1.3 DEFINICION DE PARASITISMO Y PATOGENICIDAD

Según Agrios (2005) un parásito es el organismo que vive ya sea fuera o dentro de otro organismo, del cual obtiene su alimento. A la relación que se establece entre un parásito y su hospedante se denomina parasitismo. Un fitoparásito es un organismo que se asocia de manera estrecha con una planta y que se reproduce o desarrolla a expensas de ella. Por lo común, la obtención de los nutrientes y agua de la planta hospedante por el parásito da origen a una menor eficiencia en el desarrollo normal de la planta y provoca un detrimento en su posterior desarrollo y reproducción. Así, en la mayoría de los casos el parasitismo se encuentra estrechamente relacionado con la patogenicidad, debido a que la capacidad que tiene el parásito de invadir y establecerse en su hospedante por lo general provoca el desarrollo de una enfermedad en este último De acuerdo a (Madriz, 2002, citado en Orellana, 2014) señala que un patógeno puede ser muy patogénico o poco patogénico para un hospedante dado. El grado de patogenicidad se define frecuentemente como virulencia. De esta forma y dependiendo de su habilidad de causar enfermedad, un patógeno puede ser altamente virulento para un hospedante y levemente virulento para otro. También indica que el nivel de virulencia se determina con respecto a la resistencia del hospedante. En otras palabras, la virulencia es un concepto estrechamente ligado a la habilidad del patógeno de superar la resistencia de la planta. También se podría describir como el grado de agresividad del patógeno.

3.4.1.4 SÍNTOMA

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Según Agrios (2005), define síntoma como la apariencia que toman las plantas o sus tejidos cuando han sido infectados por un patógeno o cuando un factor ambiental los ha afectado.

Según (Cadenas s.f., citado en Orellana, 2014, p.21) señala que el síntoma es la manifestación externa de la enfermedad que puede ser percibida por uno o más de nuestros sentidos.

Es el efecto que produce el agente causal en el hospedero. La desintegración, colapso de células, podriciones y otros trastornos de mayor a menor grado dependiendo en la habilidad de intervención del parasito en las funciones vitales de la planta. FAO (2006)

Según (Bazán,1964, citado en Orellana, 2014, p.21-22) divide en tres tipos los síntomas que producen las enfermedades de las plantas:  Necróticas, que es la muerte del tejido afectado. Puede afectar órganos enteros como hoja, brotes, ramas, etc. O partes de estos o pudrición de la madera, chancros en la corteza y otros.  Atróficos, que es el resultado de la división anormal o generación de células, siendo el más común el enanismo producidos por condiciones ambientales desfavorables, condiciones inapropiadas de suelo o presencia de virus o hongos. Otra consecuencia es la clorosis o amarillamiento del follaje, ocasionado por virus, bacterias, hongos, excesos o deficiencias de elementos nutritivos.  Hipertróficos, que se caracteriza por un desarrollo anormal de los diversos órganos debido a una división exagerada de las células o en un aumento exagerado de ellas, o ambas cosas a la vez. Trayendo como consecuencia agallas, tumores, lenticelas hipertrofiadas, deformación de frutos y flores.

3.4.1.5 SIGNO

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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Agrios (2005), señala que en muchas enfermedades el patógeno se desarrolla o produce varias estructuras, sobre la superficie de su hospedante. Estas estructuras, que incluyen al micelio, esclerocios, esporo foros, cuerpos fructíferos y esporas, se les denominan signos y difieren de los síntomas, los cuales sólo se refieren a la apariencia que toman las plantas o sus tejidos cuando han sido infectados.

(Cadenas s.f., citado en Orellana, 2014, p.22) nos dice que el signo es la presencia visible del agente causante de la enfermedad, sea mediante una o varias de sus estructuras.

Es la manifestación directa del patógeno actuante. Por ejemplo, el micelio o carpófago de los hongos. FAO (2006)

Según (Bazán,1964, citado en Orellana, 2014, p.22) indica que la mayoría de los signos son identificados por las estructuras vegetativas o reproductivas de los agentes patógenos, los cuales se presentan sobre o cerca de la planta afectada. Por consiguiente, es necesario conocer los varios estados del organismo patógeno, especialmente si se trata de un agente fungoso, con el objeto de reconocerlo y evaluar los signos. Las diferentes fructificaciones del hongo se presentan comúnmente y son signos valiosos. En algunos casos puede no haber síntomas de una enfermedad, pero si estar presente los signos.

3.4.1.6 BASIDIOMYCOTAS

El phyllum basidiomycota incluye a los hongos de mayor complejidad morfológica las características comunes que presentan basidios y se reproducen mediante las basiodiosporas, entre las que figuran las setas, hongos gelatinosos, carbones y royas. Su papel en la naturaleza es esencial sobre todo de los descomponedores de materia orgánica, sin embargo, como las royas y carbones son peligros fitosanitarios. (Agrios, 2008). 15


3.4.1.7 HONGO PATÓGENO Melampsoridium alni

3.4.1.7.1

IMPORTANCIA

Melampsoridium alni es un parasito obligado, agente patógeno causante de la enfermedad en la especie Alnus acuminata una especie forestal fuente de productos maderables y no maderables. (León 1988 citado, en Reátegui 2012, p.08) Según (Argüedas, 1998) las “royas” dentro de la cual se encuentra el Melampsoridium alni, representa un problema fitosanitario de importancia económica ya que afecta las plantaciones forestales y reduce en forma sustancial el potencial de los bosques naturales.

3.4.1.7.2

CARACTERISTICAS

 Melampsoridium alni es un hongo parásito perteneciendo a la orden de los pucciniales, hongos con los ciclos de vida muy complejos.  En este grupo cada especie de hongo parasita a una especie de planta o solo a unas pocas, ya que necesitan estar muy especializados para sobrepasar las barreras químicas y físicas que esta les impone, impidiendo que las especies generalistas sean frecuentes.  Es un hongo que principalmente daña el follaje, pero también puede atacar las yemas y las ramitas terminales de la especie a la que ataca.

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3.4.1.7.3

TAXONOMIA JERARQUICA

Reino: Fungi

División: Basidiomycota

Clase: Pucciniomycetes

Orden: Pucciniales

Familia: Pucciniastraceae

Género: Melampsoridium

Especie: Melampsoridium sp.

(Wingfield , Ericson, Sizaro, & Burdon, 2004)

3.4.1.7.4

CONDICIONES CLIMATICAS DE DESARROLLO La plaga tiene una preferencia por los ambientes más húmedos y condiciones de frío. Especies típicamente de clima templado, en el trópico se encuentran especies a grandes alturas. Ciclo de vida completamente expandido, heteróico. (Buriticá, Salazar, & Pardo, 2014)

3.4.1.7.5

HABITAT

17

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE El hongo patógeno Melampsoridium alni se puede encontrar en las hojas de los árboles de Alnus acuminta. En caso de la madera, la plaga es un patógeno foliar por lo que hay menos riesgo de encontrarlo ahí, aunque el patógeno puede sobrevivir en yemas latentes y ramas terminales (Arguedas y Espinoza 2007 citado en, Reátegui 2012, p.66)

3.4.1.7.6

DISTRIBUCIÓN El hongo patógeno es nativo y tiene sus orígenes en Asia oriental y se encontró por primera vez en los estados del Báltico donde se presume que llegaron a través del comercio de plantas de vivero. Los primeros registros, en este caso de Melampsoridium hiratsukanum que se dieron en Europa se encontraron en Estonia, Lituania y Letonia, en Finlandia se registró por primera vez en 1997, En Noruega y Hungría en 2001, Suiza 2002 y en Dinamarca en 2004 (Hantulla & Sholler, 2013).

3.4.1.7.7

CICLO DE LA ENFERMEDAD Según (Taxateca, s.f.) la vida de los pucciniales comienza con la germinación de una basidióspora. Esta empieza a crecer sobre la superficie de una hoja y si en las primeras etapas de su crecimiento encuentra un estoma o alguna abertura por el cual atravesar la epidermis sobrevivirá, sino morirá. Una vez que la hifa germinada de la basidióspora alcanza el interior de la hoja, empieza a crecer. Al madurar forma unas estructuras en la cara superior de las hojas llamadas espermogonios, los cuales forman espermacios, generalmente envueltas en una masa gelatinosa. Esta masa favorece la adhesión de estas esporas a los insectos, de manera que son transportadas, además de favorecer que otras esporas queden pegadas a los espermacios. Cuando un espermacio viaja del espermogonio que lo ha producido hasta otro espermacio sexualmente compatible, germina y fecunda a una hifa de este último, pasando el núcleo de la picnidiospora a la hifa fecundada. Esta hifa, ahora con el material genético de dos progenitores y dos núcleos genéticamente diferentes por célula, empieza a crecer con vigorosidad y forma un micelio en la cara inferior de la hoja, que terminará formando una estructura llamada ecio. El ecio forma una multitud de esporas asexuales llamadas eciosporas, con dos núcleos cada una. Las eciosporas son transportadas hasta ser depositadas sobre las hojas o tallos jóvenes de la planta huésped, 18

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE donde germinan. Al madurar el micelio originado a partir de esta eciospora forma unos cuerpos fructíferos llamados uredosoros, que forman uredosporas, generalmente con una pared celular más o menos engrosada. Estas uredosporas parasitan a la misma especie de planta que forma los uredosoros, sirviendo para propagar rápidamente y de una forma asexual una posible colonización aislada. Cuando las condiciones son las adecuadas, el hongo deja de formar uredosoros y forma un nuevo cuerpo fructífero, los telios. En los telios se producen unas esporas, las teliosporas, generalmente con la pared gruesa y formadas por varias células levantadas por un pie. Estas teliosporas son dispersadas y cuando las condiciones son favorables germinan. En esta etapa el crecimiento proviene a expensas del material de reserva de las esporas. Antes de germinar los dos núcleos que posee cada célula, un núcleo de cada padre, se fusionan para formar un único núcleo diploide (con el doble de copias de cada cromosoma). Tras la germinación se forma una pequeña hifa que rápidamente forma un basidio dividido por varias paredes celulares que formará las basidiosporas, empezando de nuevo el ciclo. Este ciclo de vida tan complejo favorece la dispersión y parasitación masiva y permite parasitar a diferentes tipos de plantas para así sobrevivir durante las diferentes épocas del año. Sin embargo, en muchas especies, que parasitan a solo una planta durante todo su ciclo vital, este ciclo tan complejo queda como un recuerdo evolutivo.

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Figura 1: Ciclo de vida del orden Pucciniales. Tomado de ( Galan Boluda & Zamora Señoret, s.f.)

 En el caso del patógeno Melampsoridium hiratsukanum el cual esta dentro de la misma familia y genero de Melampsoridium alni tiene un ciclo de vida macrociclico, hospedante y alternante en el que las basidiosporas infectan a la especie Larix spp el cual es el anfitrión aecial, allí se da el desarrollo de espermogonios y aecia (formando aeciosporas). Las eciosporas puede infectar al huésped telial, Alnus spp., pero no a otro Larix. En las hojas del Alnus se forma la estructura llamada uredio la cual produce urediosporas. Este estado es importante para la reproducción y la dispersión, las uredosporas son las únicas esporas que infectan al huésped sobre el que se formaron. Al final del período de vegetación la espora entra a un estado de hibernación llamada Telia produciendo teliosporas de pared gruesa. (Hantulla & Sholler, 2013)  A continuación, se presentan las colecciones examinadas, observación de los diferentes estados espóricos realizado con la ayuda de un estereomicroscopio Boeco® y un microscopio Carl Zeiss® Axiostar Plus y acoplado a este, una cámara digital Canon® PowerShot G5 con la que se tomaron microfotografías, del orden Pucciniales. Figura Canasta amphilophii del orden Pucciniales; A-C, uredosoros; A, uredosporas y paráfisis; B, vista lateral paráfisis con ápice mucronado; C, vista inferior, base en forma de disco; D-E, uredosporas; D, vista media; E, vista superficial; F-M. Prospodium aculeatum del orden Pucciniales: F, espermogonio; G-J eciosporas uredinoides; G, eciosporas elipsoides en vista media; H, eciosporas elipsoides en vista superficial; I, eciosporas globosas en vista media; J, eciosporas globosas en vista superficial; K, paráfisis; L-M, teliosporas; L, vista media; M, vista superficial (Buriticá, Salazar, & Pardo, 2014)

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3.4.1.7.8

ETAPA DE CRECIMIENTO  En medios de cultivo, el crecimiento de la espora, con elongación del tubo germinal y la primera ramificación de la hifa se evidencio después de aproximadamente 48 h.  Los tubos germinales de esporas mostraron una gran variación de longitud, y se observaron varios tubos germinativos largos (hasta 400 mm) incluso antes de que comenzara la ramificación de las hifas.  El micelio saprofito comenzó a crecer después de dos días.  La ramificación de hifas secundaria y terciaria comenzó después de 48 - 72 h.  El crecimiento utilizando solo nutrientes almacenados cambios totalmente al sostenido por nutrientes del medio de cultivo en las siguientes 24 h fue en ese momento donde la formación de hifas se hizo más intensa, a la semana las hifas se convirtieron en mallas de abundantes primordios micelares  La densidad del inóculo pareció ser fundamental para inducir el crecimiento saprófito en todos los medios nutrientes. Las urediniosporas germinaron más profusamente donde el medio de agar se había inoculado más densamente. Las colonias también 21

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE emergieron más rápidamente y fueron más numerosas en áreas donde el inóculo fue mayor. (Moricca & Ginetti, 2015)

3.4.2

ESPECIE FORESTAL HOSPEDERA Alnus acuminata

3.4.2.1 TAXONOMÍA Nombre científico: Alnus acuminata H.B.K. Nombres comunes: Aliso, Jaul Reino: Plantae División: Angiospermae (Magnoliophyta) Clase: Magnoliopsida

Subclase: Hamamelidas

Orden: Fagales

Familia: Betulaceae

Género: Alnus (SNIF, 2000)

3.4.2.2 IMPORTANCIA ECONÓMICA

La especie Alnus acuminata contribuye a aumentar la fertilidad del suelo gracias a una simbiosis radicular con una bacteria del género Frankia, lo que trae como consecuencia la fijación de nitrógeno atmosférico en el interior del suelo. No requiere de materia orgánica, aunque sí necesita de una buena cantidad de humedad en el suelo en la primera etapa de su vida. Además, tiene buena poda natural, lo que contribuye a generar una madera libre de nudos.

22

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Es una especie que evita grandemente la erosión, pues crece bien en pendiente y tiene raíces superficiales muy extendidas. En la sierra peruana sirve como protector natural de las riberas; en costa Rica se le usa con fines de restauración de las cuencas hidrográficas, por lo que se han hecho plantaciones masivas. El árbol vivo es utilizado como cortina rompevientos y para la formación de terrazas; es también usado en cultivos agroforestales, pues compite poco con las otras plantas (Pretell, 1985, citado en Reátegui, 2012, p.15).

3.4.2.3 DESCRIPCIÓN

3.4.2.3.1

FORMA Árbol perennifolio o caducifolio, de 10 a 25 m (hasta 30 m) de altura, con un diámetro a la altura del pecho de 35 a 40 cm (hasta 1 m). Algunos individuos llegan a superar los 42 m de altura en plantaciones. (SNIF, 2000)

3.4.2.3.2

COPA Y HOJAS. Copa estrecha y piramidal (en plantaciones), en bosques sucesionales toma formas irregulares. (SNIF, 2000) Las Hojas son simples, alternas, acuminadas, de forma elíptica u ovoide, de 8 a 15 cm de largo por 3 a 6 cm de ancho, con bordes aserrado irregularmente. El haz es de color verde oscuro y algo brillante y el envés verde claro a grisáceo, y frecuentemente con pelos de color ocre o rojizos. Haz y el envés glabro en la madurez. (Ospina, Hernández, Gómez, Godoy, & Aristizábal, 2005)

3.4.2.3.3

FUSTE Y RAMAS.

23

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Tiene fuste recto, con aletones pobremente desarrollados, y es cónico cuando crece sin competencia. (Ospina, Hernández, Gómez, Godoy, & Aristizábal, 2005) En campo abierto desarrolla ramas gruesas desde la base mientras que en bosque denso alcanza una mayor proporción de tronco libre de ramas y nudos por una poda natural. (SNIF, 2000)

3.4.2.3.4

CORTEZA

Según (Ospina, Hernández, Gómez, Godoy, & Aristizábal, 2005) la corteza es de color grisáceo, a veces plateado, con lenticelas amarillentas, ovales y circulares dispuestas horizontalmente a lo largo del fuste. Escamosa en individuos viejos, con frecuencia marcada con arrugas transversales o constricciones circundantes.

3.4.2.3.5

FLORES La especie es monoica. Las inflorescencias masculinas se encuentran formando amentos terminales de 7 a 12 cm de largo, con numerosas flores; las inflorescencias femeninas semejan conos de 1 a 1,5 cm de longitud, con flores numerosas. (Reynel et al. 2007, citado en Reátegui, 2012, p.17)

3.4.2.3.6

FRUTO

Están dispuestos en infrutescencias llamadas estróbilos, en forma de conos o piñas pequeñas, ovoides, en estado inmaduro son de color verdoso a amarillento y marrón al madurar, con 1,5 a 3 cm de largo, escamas leñosas, algo aladas y persistentes donde se alojan las semillas. Un árbol adulto puede producir de 6.000 a 10.000 frutos, cada una con 80 a 100 semillas. Según (Ospina, Hernández, Gómez, Godoy, & Aristizábal, 2005)

3.4.2.3.7

RAÍZ 24


Sistema radical poco profundo, amplio y extendido. (SNIF, 2000) Según (Ospina, Hernández, Gómez, Godoy, & Aristizábal, 2005) presenta nódulos, como consecuencia de la simbiosis con un actinomiceto del género Frankia, capaz de fijar el nitrógeno atmosférico. Los nódulos forman grupos hasta de 6 cm de diámetro y se concentran en los primeros cinco centímetros del suelo. Entre los componentes químicos de estos nódulos se halla un glicósido de color amarillo rojizo capaz de inhibir el crecimiento de hongos patógenos.

3.4.2.4 DISTRIBUCIÓN GEOGRAFICA

Según (Reynel et al. 2007, citado en Reátegui, 2012, p.16) indican que la especie Alnus acuminata cuenta con un amplio rango de distribución. Habita en las ecorregiones de la serranía esteparia y la ceja de Selva, en formaciones de bosque montano nublado y bosques sub-húmedos; ha sido reportado en casi todos los departamentos del país en dicho rango altitudinal. Anónimo (1983) indica que la especie es oriunda de América Central y del Sur, habita desde México hasta Argentina, incluyendo Venezuela y Ecuador. Se encuentra en los bosques de montaña en las pendientes orientales húmedas de los Andes. La misma fuente menciona, asimismo, que en nuestro país el "aliso" se encuentra en los bosques ribereños de riachuelos y en lugares húmedos, en las vertientes occidentales y en los valles interandinos, entre los 1500 y los 2800 m.s.n.m. Se ubica principalmente en los departamentos de Amazonas, Áncash, Cajamarca, Cusco, Huánuco, Junín, Lima y Puno.

3.4.2.5 HÁBITAT

25

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE El género Alnus se puede encontrar en laderas montañosas muy inclinadas con condiciones secas. Prospera en las riberas de los ríos y en pendientes húmedas. Se desarrolla en áreas de nubosidad, con neblina frecuente. (SNIF, 2000)

3.4.2.6 IMPORTANCIA ECOLÓGICA

Se establece rápidamente en espacios que dejan otros árboles llegando a formar bosquecillos secundarios de considerable extensión. Es una especie importante en los procesos de regeneración de los bosques, son calificadas como especies avanzadas, se desarrollan bien en sitios perturbados y favorecen el establecimiento de otras especies dada su capacidad para fijar nitrógeno atmosférico. (SNIF, 2000)

3.4.2.7 ZONA ECOLÓGICA

Templada húmeda, templada subhúmeda. (SNIF, 2000)

3.4.2.8 EXPERIENCIAS CON LA PLANTA

Especie con potencial para reforestación. Se puede plantar desde los 1,500 m hasta poco más de 2,800 m. Diferentes especies del género Alnus han sido utilizadas en programas de reforestación en varias partes del mundo. Sin embargo, pese a su enorme potencial para la regeneración de suelos degradados y su enorme capacidad para fijar nitrógeno atmosférico y establecerse en sitios erosionados, no hay información especializada que reúna los conocimientos y experiencias logrados con estas especies. El Alnus se ha asociado con maíz y fríjol, pastos, café, mora silvestre, helechos de exportación. Se utiliza como sombra para ganado y en linderos de potreros en Brasil y Costa Rica. (SNIF, 2000)

3.4.2.9 CULTIVO

26

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Hay que proteger a los árboles pequeños del ganado hasta que alcancen unos 4 ó 5 m de altura. Es imprescindible eliminar la competencia de plantas herbáceas o arbustivas durante los dos o tres primeros años aún en plantaciones silvo pastoriles. Presenta auto poda o poda natural. (SNIF, 2000)

3.4.2.10 PROPAGACIÓN

3.4.2.10.1 REPRODUCCIÓN ASEXUAL  Brotes o retoños. Una característica de la especie es la presencia de brotes basales tanto en árboles suprimidos o en estado de alta competencia por luz y nutrimento, como en árboles vigorosos.  Cortes de raíz. Se propaga fácilmente por cortes de raíz.

3.4.2.10.2 REPRODUCCIÓN SEXUAL  Semilla (plántulas). Se reproduce fácilmente y casi exclusivamente por semilla.  Regeneración natural. Sus plántulas se encuentran fácilmente en suelos perturbados y terraplenes. (SNIF, 2000)

3.4.2.11 EFECTO Y SERVICIO AL AMBIENTE  Cobertura de hojarasca.  Conservación de suelo  Control de la erosión.  Protección de cuencas, debido a que estabiliza pendientes.  Fijación de nitrógeno. Algunas especies de aliso contribuyen con 40 a 320 kg/N/ha/año en condiciones de campo, y en algunos casos a llegado a los 780 kg/N en un período de cinco años. Esta capacidad varía con las condiciones climáticas. 27

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE  Mejora la fertilidad del suelo  Beneficia los cultivos que crecen junto a esta especie.  Recuperación de terrenos degradados.  Barrera rompe vientos.  Sombra y refugio a veces es utilizado como árbol de sombra en cafetales. (Ospina, Hernández, Gómez, Godoy, & Aristizábal, 2005)

3.4.2.12 TOLERANCIA  Beneficiada por la luz en las etapas iniciales y tardías del desarrollo.  Suelos con buen drenaje, húmedos, profundos.  Resistente a heladas, presenta su límite inferior alrededor de los 4 ºC pero hay poblaciones de Alnus spp. que soportan temperaturas hasta de -10 ºC.  Daño por hongos patógenos.  Tolerante a suelos compactados, desde grava o arena hasta arcilla, suelos pobres.

3.4.2.13 DESVENTAJAS  Le afectan los vientos secos y fríos que le provocan un pobre desarrollo. Competencia por malezas.  Daño por hongos  Daño por insectos (SNIF, 2000).

3.4.2.14 INTERACCIÓN BIOLÓGICA

Forma asociaciones con hongos micorrícicos Glomus Intraradix.

3.4.2.15 USOS

28

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE  Se emplea en la fabricación de varios artículos artesanales e instrumentos musicales.  Combustible, leña y carbón  Construcción rústica. Puentes y pilotes.  La corteza contiene taninos que pueden emplearse en curtición de cueros.  Mangos para herramientas.  Gran potencial para producción de madera. Puertas, pisos, cercas, muebles, palillos y cabos de fósforos, zapatos ortopédicos, moldes para fundición de metales, molduras, ataúdes, lápices, madera en rollo, aserrío, embalajes, ebanistería.  El Alnus no se recomienda para estructuras y construcciones que requieran alta resistencia, dado que la madera es muy suave.  Medicinal, es antiescrofulosa, astringente, atenuante de afecciones cutáneas.

3.5.

SIGNOS Y SINTOMAS

Las uredosporas constituyen elementos de importancia para la identificación de Melampsora spp; su ornamentación y tamaño permiten identificar especies. En todos los casos, las uredosporas son unicelulares, pediceladas, con episporio espinulescente, amarillas y acompañadas siempre de paráfisis más o menos clavuladas y hialinas que las sobrepasan en altura.

3.5.1. SIGNOS  (Arguedas et al., 2007), menciona que presentan manchas irregulares color amarillo en el envés de las hojas. Comprobando con las muestras 29

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE observadas en campo; ya que la mayoría de los folios estaban afectados con las roya Melampsoridium alni ocasionando la pérdida del follaje de la especie forestal.  (Arguedas, 2006) Afecta el follaje de plántulas en el vivero hasta árboles adultos. Estas hojas presentan inicialmente en el envés una coloración naranja de las grandes acumulaciones de esporas, posteriormente, las áreas cloróticas se necrosan en forma generalizada y las hojas severamente afectadas pueden caer (Figura 1).

3.5.2. SINTOMAS 

Según (Reátegui ,2010), dice que un agente biológico puede causar daño al follaje y otras partes de la planta. Por tanto, la roya Melampsoridium alni produce marchitamiento en las hojas hasta la pérdida mayoritaria del follaje.



(Arguedas et al., 2007)Dicen que en los folios pueden formar áreas necróticas extensivas color pardo oscuro en ambos lados de la lámina foliar tanto en el haz como en el envés a causa de la presencia de la roya Melampsoridium alni; ya que este patógeno se reproduce de manera rápida produciendo hiperplasias en la mayoría de los folios.



Según (McKenzie et al., 2013), mencionan que toda especie de roya como el Melampsoridium alni tiene sus propias características morfológicas con síntomas dependiendo al lugar de la especie; ya que se debe a la presencia de nutrientes o la presencia de poca agua. Por lo 30

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE tanto, la especie Alnus acuminata se encontraría débil a causa de los factores ambientales permitiendo el fácil de la roya Melampsoridium alni hospedarse en esa especie forestal para establecer su comunidad. 

(Mc Kenzie EHC 1, Padamsee, M. Dick, M. 2013) En “El primer reporte de hongo en Alnus en Nueva Zelanda”. Menciona que en Alnus spp. Los síntomas consistían en numerosos uredinios anaranjados en la superficie inferior de la hoja con una mancha amarillo-marrón correspondiente en la superficie superior.

Fig.1 Síntomas de infección uredinial en hojas de Alnus cordata

Fig.2 Síntomas de infección telial en hojas de Alnus sp

31


Fig.3 Síntomas de infección uredinial en hojas de Betula nigra

3.6 MORFOMETRIA DE LOS SINTOMAS Cuando inicia el ataque por parte del hongo se presentan manchas irregulares de color amarillo en el envés de las hojas; posteriormente las hojas pueden colapsar, formándose áreas necróticas extensivas de color pardo oscuro en ambos lados del limbo (Kurkela et al, 1999). 3.6.1

PUSTULAS

Producida por las uredosporas con la cual el patógeno intensifica su infección en las hojas  Color de síntoma: amarillentas a anaranjadas  Forma de síntoma: Irregulares o circulares  Ubicación del síntoma: Envés 3.6.2

MANCHAS    

Tipo de síntoma: Manchas Color de síntoma: Pardo oscuras Forma de síntoma: Irregulares Ubicación del síntoma: Haz y envés

3.7 MORFOMETRIA DE LOS SIGNOS Las características morfológicas que ahora se consideran para diferenciar las especies de Melampsoridium que se encuentran en Alnus incluyen las dimensiones, el número y la distribución de los poros, y la ornamentación de las urediniosporas. M. hiratsukanum:  Urediniosporas relativamente pequeñas en comparación con las otras 2.  Equinulada uniformemente. M. betulinum y M. alni:

32

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE   

Las urediniosporas de ambas son de tamaño similar Carecen de equinulacion en el vértice. Se diferencian en el número y distribución de los poros germinales. (Kaneko y Hiratsuka 1981, citado en (Hantula, Kurkela, Hendry, & Yamaguchi, 2009)

Las uredosporas que presenta el hongo patógeno Melampsoridium alni son unicelulares, con paredes ornamentadas tipo equinulada y hialinas (Reátegui, 2012). 3.8 MEDICION DEL PATÓGENO Para la identificación de especie se necesita una combinación de características de las urediniosporas (tamaño, equinulacion, la posición de los poros germinales) (Hantulla & Sholler, 2013)  La roya de la hoja Melampsoridium alni es muy similar morfológicamente a la roya de la hoja de abedul, M. betulinum. Las urediniosporas de la roya del abedul son lisas en su extremo redondeado superior, las medidas son las siguientes: Tabla 1 Dimensiones de las esporas en Melampsoridium betulinum

Urediniospora (um) Largo

25 a 34

Ancho

10 a 15

Promedio

28.58 × 12.42

Espesor del episporio (um)

Cantidad de células ostiolares

1.5 a 2

23 a 30

Tabla 2 Dimensiones de las urediniosporas de las colecciones neozelandesas de Melampsoridium (McKenzie, Padamsee, & Dick, 2013)

33


 Las tres royas: M alni, M betulinum, M hiratsukanum, son bastante similares. Sin embargo, las urediniosporas de M. alni tienen un único poro germinal polar en cada extremo, lo que las distingue de M. betulinum y M. hiratsukanum, que tienen 2-3 poros germinales cerca de cada extremo de la espora (Kurkela, Hanso, & Hantula, 1999)  Según fuentes de muestras de uredinia para caracterización morfológica y molecular se tiene que en caso de Melampsoridium alni en Alnus crispa se tiene las siguientes medidas:

Tabla 3 Dimensiones de Melampsoridium alni en Alnus crispa (Hantulla & Sholler, 2013). Longitud Promedio

Ancho Promedio

Espesor del episporio Promedio

32.8 a 32.4 um.

11.4 a 11.6 um.

1.76 a 1.86 um.

3.9 TAXONOMIA JERARQUICA DEL PATOGENO

34

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Melampsoridium sp. Hongo que ocasiona la roya en Alnus acuminada pertenece al filum basidiomycotas, clase pucciniomycetes, orden pucciniales, familia pucciniastraceae, genero melampsoridium. (GBIF, 2016) 3.9.1

TAXONOMIA DEL HONGO

Reino: Fungi

División: Basidiomycota

Clase: Pucciniomycetes

Orden: Pucciniales

Familia: Pucciniastraceae

Género: Melampsoridium

Especie: Melampsoridium sp. (Wingfield , Ericson, Sizaro, & Burdon, 2004)  División Basidyomicota: (Swann y David, 2007) Describen que los hongos de esta división son unicelulares, multicelulares, sexuales, asexuales y terrestres o acuáticos. El aspecto más seguro de diagnóstico es la producción de basidios(células que producen esporas sexuales), de las cuales el grupo toma su nombre.  El filum basidiomycota incluye a los hongos de mayor complejidad morfológica las características comunes que presentan basidios y se reproducen mediante las basiodiosporas, entre las que figuran las setas, hongos gelatinosos, carbones y royas. Su papel en la naturaleza es esencial sobre todo de los descomponedores de materia orgánica, sin embargo, como las royas y carbones son peligrosos fitosanitarios. (Agrios, 2008).

35


3

MATERIALES Y MÉTODOS 3.6 

LUGAR DE EJECUCION

UBICACIÓN POLITICA  La presente investigación de la roya Melampsoridium alni se ejecutó en el Distrito de Huayucachi-Huancayo; que se encuentra ubicado en la margen Izquierda del río Mantaro, a 8.7 Km. al sur de la ciudad incontrastable de Huancayo, en la Región Junín. Se tomó muestras de hojas de la especie Alnus acuminata.  La fase de laboratorio se realizó en el laboratorio de Manejo Forestal – UN.



UBICACIÓN GEOGRAFICA  Latitud: 12°7´8,74”S  Longitud: 75°12´51,74”O  Altitud: 3.201 m.s.n.m.  Superficie: Según el Instituto Nacional de Estadística e informática tiene 13.13 Km2

36


3.7

MATERIALES Y MÉTODOS  Tijera de podar  GPS  Cámara fotográfica  Placa Petri  Porta y cubre objetos  Cartuchera con instrumentos (asa de kolle, tijera, pinza, estilete , cúter o bisturí, guantes, mascarilla, guardapolvo y cofia)  Muestras infectados  Pizeta con agua destilada  Micrómetro  Microscópico  Estéreo microscopio olympus 8Z61  Celular LG Stylus 3

37

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE 3.8

METODOLOGÍA 3.8.2 

Diseño de la investigación TIPO DE INVESTIGACION: Aplicada por que busca el conocer para hacer las diferentes investigaciones.



NIVEL: Descriptiva buscan desarrollar una imagen o fiel representación (descripción) del fenómeno estudiado a partir de sus características morfológicas.



DISEÑO: No experimental porque se realiza sin manipulación de las varibles , lo que se hace es observar fenómenos tal como se dan , para después analizarlos.



NO PROBABILISTICO: Muestro de partes afectadas en el hospedante de manera no intencionada.

3.8.3

Población y muestra

3.8.4

Variables de investigación

3.8.5

Técnica de colecta de datos 

Técnica de colecta de datos  Esta forma de colecta de datos permite determinar el número de folios o partes vegetales enfermas con relación al total de las ramas principales observadas. Corresponde a la relación porcentual, del número de folios infectados con el patógeno, con respecto al total de los folios de cada rama. P (%) =N° unidades infectadas x 100 N° total de unidades



Técnica de análisis de datos  Para la roya Melampsoridium alni en la toma de muestras de hojas de la especie Alnus acuminata.

38

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE 

Técnica de colecta de datos  Esta forma de colecta de datos permite determinar el número de folios o partes vegetales enfermas con relación al total de las ramas principales observadas. Corresponde a la relación porcentual, del número de folios infectados con el patógeno, con respecto al total de los folios de cada rama. P (%) =N° unidades infectadas x 100 N° total de unidades



Técnica de análisis de datos  Para la roya Melampsoridium alni en la toma de muestras de hojas de la especie Alnus acuminata.

Reátegui Moscoso, 2010)

39

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RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Figura 1 Melampsoridium alni en la hoja del Alnus acuminata

En la figura 1. Podemos observar que el Melampsoridium se manifiesta como puntos o manchas de un polvillo amarillo, que mientras más severidad alcance en el órgano que afecta este ira degenarandose con el pasar del tiempo, más aun si no se toman medidas de contención, manifestándose en la planta en términos generales con defoliación, si observamos detenidamente la evolución del patógeno se generara una marchitez general en las hojas atacadas con abundante resequedad, opacamieno de la hoja y finalmente cayéndose de las ramas.

40


Figura 2 Grupos de Melampsoridium alni En la figura 2: En el estereoscopio electrónico, podemos observar a estos de hecho no por unidades, más bien en grupos, muy claramente podemos tomar algunas mediciones como el tamaño de ancho y largo de las conglomeraciones amarillas (720.58 de ancho, y de largo 1377.55, ambas medidas en micrómetros), en lo que nosotros a simple vista observamos círculos o manchas de esporangios de color amarillo. Como ya lo mencionamos encontramos en nuestros individuos polvillo amarillo lo que nos indica la roya pero en su fase de uredios que forman las urediniosporas, o que significa que nuestro patógeno está en su tercera fase.

41

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Las esporas sacadas y observados de la muestra en el microscopio son denominadas urediniosporas, que son producidas en grandes cantidades y corresponden al polvillo amarillo que se visualiza en el envés de las hojas del Alnus son unicelulares y físicamente tienen una forma ovalada como pequeños huevecillos de 30u de largo y 20u de ancho aproximadamente.

Los signos y síntomas han sido revisadas y reconocidas desde un inicio ya que esto es la evidencia de la presencia del patógeno en nuestro individuo, incluso lo estamos mencionando en estos resultados de nuestra investigación, con anterioridad dijimos que en las hojas encontramos ese polvillo amarillo característico de la roya en pustulas que son pequeños círculos de este polvillo fino que están regadas en el envés, asi mismo se puede observar por todo el borde de nuestros individuos hojas marchitas en el suelo a causa de el patógeno, decimos de esto que la roya causa el decaimiento foliar en el Alnus acuminata, viendo esto como un efecto negativo para nuestros individuos, revisando con nuestra literatura contrastamos la información en la cual nos dice que la roya mientras más avanza empieza a atacar a las yemas y pequeñas ramas de las plantas, algo que corroboramos en nuestros individuos pero en minimas cantidades. 42

UNIVERSIDAD NACIONAL DEL PERU FACULTAD DE CIENCIAS FORESTALES Y DEL AMBIENTE Como estamos viendo la roya le da consecuencias negativas al Alnus acuminata, el decaimiento foliar conlleva a que el árbol deje de hacer fotosíntesis, y mientras menos hojas tenga el árbol menos fotosíntesis realizara, la roya no tiene límites de atacar, se convertirá más severa y la defoliación será mucho mayor y más rápido, a lo que induce a la no ejecución de fotosíntesis, llevando a la planta a una inevitable muerte Datos recolectados con el microscopio en micrómetros. NUMERO DE ESPORA ANCHO LARGO 1 20 30 2 24 39 3 20 45 4 15 22 5 14 28 6 18 37 7 28 40 8 19 37 9 20 27 10 17 25 11 24 35 12 27 39 13 26 30 14 19 30 15 36 41 16 19 26 17 24 34 18 26 29 19 28 32 20 17 26 Análisis de varianza de un factor RESUMEN Grupos Columna 1 Columna 2

Cuenta 20 20

Suma 441 652

Promedio Varianza 22.05 29.2078947 32.6 39.5157895

ANÁLISIS DE VARIANZA Origen de las Suma de Grados de Promedio de variaciones cuadrados libertad los cuadrados F Probabilidad Entre grupos 1113.025 1 1113.025 32.3913077 1.5094E-06 Dentro de los grupos 1305.75 38 34.36184211 Total

2418.775

Valor crítico para F 4.098171731

39

43


5

CONCLUSIONES

Con los resultados obtenidos de la investigación, se puede concluir que el Alnus acuminata es afectado negativamente por el Melampsoridium alni, y se puede observar a simple vista en sus órganos vegetativos de la planta, como la defoliación, teniendo en cuenta que sus folios se presentan signos que está siendo atacada como son las pústulas de polvillo amarillo en el envés principal indicador de la roya

6

RECOMENDACIONES

En primer lugar una recomendación es que a la hora de recolección de las muestras, se tenga un buen recipiente en el que no se dañe la muestra preferentemente con tapa. Usar los implementos de seguridad al usar los equipos del laboratorio, tomar bien las medidas, registrar los pasos de cómo se efectuó.

7

REFERENCIA BIBLIOGRAFICA

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FIGURA 1: Envés de la hoja de Alnus acuminta infectada por el hongo Melasporidium alni

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ANEXOS

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