Microscopia 4x5i5y

2012 MICROSOPIA

JANNER SALCEDO

MICROSCOPIA

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ALUMNOS: ARCINIEGAS URBINA CARLOS ANDRES GALEANO KELLY TATIANA NIEVES LOPERENA DIDI ALEXANDER OROZCO SALCEDO MANUEL RIOS MARIA PAULA SIERRA RANGEL ENRIQUE VILLA STEFANY MARIA

PROFESOR: Lic. JANNER SALCEDO

UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR INGENIERIA AGROINDUSTRIAL BIOLOGIA VALLEDUPAR / CESAR 2012

MICROSCOPIA

MICROSCOPIA I

EL MICROSCOPIO Es un instrumento de óptica que permite ver de cerca y aumentados objetos pequeños y detalles estructurales imperceptibles a simple vista. El microscopio óptico está formado por tres sistemas: a) El sistema mecánico: pie o base, tubo, revolver, columna, platina, carro, tornillo micrométrico y tornillo micrométrico. b) El sistema óptico: oculares y objetivos (secos y de inmersión).

c) El sistema de iluminación: condensador, diafragma, filtro y fuente de luz.

CLASES DE MICROSCOPIO 

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EL MICROSCOPIO SIMPLE O LUPA: esta compuesto por una sola lente o un sistema de lentes, que dan una imagen aumentada derecha virtual. MICROSCOPIO COMPUESTO: esta compuesto por lentes o sistema de lentes dispuestas en el mismo eje óptico. Así el objetivo va a producir una imagen real,

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invertida y mayor.

PODERES DEL MICROSCOPIO a) Aumento: nos permite magnificar, agrandar el tamaño de un objeto que a simple vista no se observa. b) Resolución: es la distancia mínima entre dos puntos próximos que pueden verse separados. c) Definición: nos permite formar imágenes claras con contornos definidos. d) De foco a campo: nos permite observar varios planos en un solo enfoque.

PRE-LABORATORIO 1) Investigar los tipos de microscopio  Microscopio estereoscópico o de disección: El diseño de este instrumento es distinto al del diagrama de más arriba y su utilidad es diferente, pues se utiliza para ofrecer una imagen estereoscópica (3D) de la muestra. Para ello, y como ocurre en la visión binocular convencional, es necesario que los dos ojos observen la imagen con ángulos ligeramente distintos. Obviamente todos los microscopios estereoscópicos, por definición, deben ser binoculares (con un ocular para cada ojo), por lo que a veces se confunden ambos términos. Existen dos tipos de diseño, denominados respectivamente convergente (o Greenough) y de objetivo común (o Galileo).

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Microscopio

compuesto:

Un

microscopio

compuesto

es

un

microscopio óptico que tiene más de una lente de objetivo. Los

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microscopios compuestos se utilizan especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en láminas tan finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y organismos no visibles a simple vista.

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Microscopio de contraste de fase: permite observar células sin colorear y resulta especialmente útil para células vivas. Este aprovecha las pequeñas diferencias de los índices de refracción en las distintas partes de una célula y en distintas partes de una muestra de tejido. La luz que pasa por regiones de mayor índice de refracción experimenta una deflexión y queda fuera de fase con respecto al haz principal de ondas de luz que pasaron la muestra. Aparea otras longitudes de onda fuera de fase por medio de una serie de anillos ópticos del objetivo y del condensador, anula la amplitud de la porción fuera de fase inicial del haz de luz y produce un contraste útil sobre la imagen. Las partes oscuras de la imagen corresponden a las porciones densas del espécimen; las partes claras de la imagen corresponden a porciones menos densas. Por lo tanto estos microscopios se utilizan para observar células vivas, tejidos vivos y cortes semifinos no coloreados.



Microscopio

electrónico:

Un

microscopio

electrónico es aquél que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten alcanzar una capacidad de aumento muy superior a los microscopios convencionales (hasta 2 aumentos comparados con los de los mejores microscopios ópticos) debido a que la longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones "visibles". 

Microscopio de campo luminoso: imágenes oscuras frente al campo luminoso. Permite el estudio de las estructuras internas de la muestra, para lo cual ésta debe ser dispuesta en una fina capa que puede ser atravesada por la luz.

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Microscopio de luz ultravioleta: La imagen en el microscopio de luz ultravioleta depende de la absorción de esa luz por las moléculas de la muestra. La fuente de luz ultravioleta tiene una longitud de onda de 200 nm, por lo tanto puede alcanzar una resolución de 100 nm. La microscopia ultravioleta no es muy diferente del funcionamiento de un espectrofotómetro pero sus resultados son registrados en fotografías. La muestra no se puede observar directamente a través del ocular porque la luz ultravioleta puede dañar la retina. El método sirve para detectar ácidos nucleicos, proteínas que contienen determinados aminoácidos. Mediante longitudes de ondas específicas para la iluminación se puede obtener mediciones espectrofotométricas para cuantificar el DNA y el RNA de cada célula. El microscopio de luz ultravioleta utiliza el rango ultravioleta del espectro luminoso en lugar del rango visible, bien para aumentar la resolución con una longitud de onda menor o para mejorar el detalle absorbiendo selectivamente distintas longitudes de onda de la banda ultravioleta. Dado que el vidrio no transmite las longitudes de onda más cortas de la luz ultravioleta, los elementos ópticos de estos microscopios están hechos con cuarzo, fluorita o sistemas de espejos aluminizados. Además, dado que la radiación ultravioleta es invisible, la imagen se muestra con fosforescencia en fotografía o con un escáner electrónico. El microscopio de luz ultravioleta se utiliza en la investigación científica.

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Microscopio de fluorescencia: es una variación del microscopio de luz ultravioleta en el que los objetos son iluminados por rayos de una determinada longitud de onda. La imagen observada es el resultado de la radiación electromagnética emitida por las moléculas que han absorbido la excitación primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onda. Para dejar

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

pasar sólo la emisión secundaria deseada, se deben colocar filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo. Se usa para detectar sustancias con autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con fluorocromos. Microscopio de campo oscuro: utiliza un haz enfocado de luz muy intensa en forma de un cono hueco concentrado sobre el espécimen. El objeto iluminado dispersa la luz y se hace así visible contra el fondo oscuro que tiene detrás, como las partículas de polvo iluminadas por un rayo de sol que se cuela en una habitación cerrada. Por ello las porciones transparentes del espécimen quedan oscuras, mientras que las superficies y partículas se ven brillantes, por la luz que reciben y dispersan en todas las direcciones, incluida la del eje óptico que conecta el espécimen con la pupila del observador. Esta forma de iluminación se utiliza para analizar elementos biológicos transparentes y sin pigmentar, invisibles con iluminación normal, sin fijar la muestra, es decir, sin matarla. También es bastante utilizado en la observación de muestras metalográficas para la observación de detalles en superficies con alta reflectancia. El objetivo recibe la luz dispersa o refractada por las estructuras del espécimen. Para lograrlo, el microscopio de campo oscuro está equipado con un condensador especial que ilumina la muestra con luz fuerte indirecta. En consecuencia el campo visual se observa detrás de la muestra como un fondo oscuro sobre el cual aparecen pequeñas partículas brillantes de la muestra que reflejan parte de la luz hacia el objetivo. El efecto es similar a las partículas de polvo que se ven en el haz de luz emanado de un proyector de diapositivas en una habitación oscura. La luz reflejada por las partículas de polvo llegan hasta la retina del ojo, lo que las hace visibles. La luz dispersa permite incluso distinguir partículas más pequeñas que el poder separador del sistema óptico usado por transparencia. Los condensadores que se emplean en Microscopía de campo oscuro son de dos tipos: del tipo paraboloide (tiene una superficie espejada), y los del tipo cardioide, con dos superficies espejadas. El empleo de uno u otro es indistinto, mediante cualquiera de ambos, la luz no incide

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directamente en el objetivo (este es el objetivo de estos condensadores), sino que incide con una apertura numérica mayor al del objetivo.

2) Realice un cuadro comparativo que indique las ventajas y desventajas de utilizar un microscopio fotonico y un electrónico. TIPOS DE VENTAJAS DESVENTAJAS MICROSCOPIOS  Aumenta hasta  No se pueden 2OOOX los observar detalles objetos y detalles más pequeños que el ojo humano como los no puede ver. organelos FOTONICO celulares.  Algunos no consumen energía.  Es de fácil traslado.  Permite ver muestras vivas.   ELECTRONICO

Aumenta hasta 100.000X un objeto. Podemos observar estructuras como los organelos celulares.

 

No permite observar muestras vivas. Difícil traslado del equipo.

3) Defina que es un lente cóncavo y convexo y cuál es su utilidad en microscopía.  Las lentes convergentes o positivas: éstas se reconocen por ser más gruesas en el centro que en los bordes, razón por la cual también se les llama convexas. Cuando una serie de rayos paralelos pasan a través de una lente de superficies convexas

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(lentes convergentes), los rayos convergen todos hacia un punto denominado foco. Es fácil entender éste fenómeno si se toma en cuenta el principio de refracción ( que es el cambio de dirección un rayo de luz o una radiación cualquiera que pasa oblicuamente de un medio a otro de diferente densidad). Nótese que cualquier superficie curva puede considerarse constituida por infinidad de planos diminutos; de modo que al pasar la luz por el lente, sólo el rayo central incide perpendicularmente a la superficie de la lente y se transmite en línea recta, mientras que todos los otros rayos caen oblicuamente y, en consecuencia , sufren refracción. El hecho de que la oblicuidad sea más pronunciada en los extremos de la lente, hace que en ésta parte los rayos sufran una mayor desviación. Debido a que la luz viaja con menor velocidad en vidrio que en el aire, la porción de ondas que atraviesa las partes más gruesas de la lente se retarda en relación con la que pasa por las partes más delgadas. En consecuencia, las ondas sufren una curvatura. El que la lente converja los rayos de luz hace que se forme una imagen del objeto en una pantalla situada al otro lado de la lente. La imagen está enfocada si la pantalla se coloca a una distancia determinada, que depende de la distancia del objeto y del foco de la lente. La lente del ojo humano es convexa, y además puede cambiar de forma para enfocar objetos a distintas distancias. La lente se hace más gruesa al mirar objetos cercanos y más delgados al mirar objetos lejanos. A veces, los músculos del ojo no pueden enfocar la luz sobre la retina, la pantalla del globo ocular. Si la imagen de los objetos cercanos se forma detrás de la retina, se dice que existe hipermetropía. 

Las lentes divergentes o negativas: éstas son más delgadas en el centro que en los bordes, y por éste motivo se les denomina también cóncavas. Cuando la luz pasa a través de una lente de caras cóncavas (lente divergente), los rayos experimentan una desviación que los aleja del rayo central. Al ser ésta lente más delgada en el centro que en los extremos, la parte central de la onda atraviesa más rápidamente el centro de la lente y se hace curva hacia delante. A diferencia de las lentes convexas, que producen imágenes reales, las cóncavas sólo producen imágenes virtuales, es decir, imágenes de las que parecen proceder los rayos de luz. En este caso es una imagen más pequeña situada delante del objeto (el trébol). En las gafas o anteojos para miopes, las lentes cóncavas hacen que los ojos formen una imagen nítida en la retina y no delante de ella.

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La utilidad de los lentes cóncavos y convexos en microscopía es que el microscopio está basado en lentes ópticos. Este uso de una única lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros aparatos ópticos. 4) Que función realiza el aceite de inmersión en la microscopía óptica. La función del aceite de inmersión es restringir el movimiento de la muestra, además de evitar el rozamiento entre el cubre objetos y el objetivo. INFORME DE MICROSCOPIA I Primero nos familiarizamos con el laboratorio, luego el profesor nos mostró el microscopio y sus partes, nos explicó cada una de las funciones del microscopio y las funciones de cada una de sus partes. Aprendimos la importancia del microscopio y de lo maravilloso que es usar este equipo. También aprendimos las diferencias entre el microscopio simple y el compuesto y sus respectivas ventajas y desventajas. MATERIALES Microscopio

CONCLUSION El microscopio es una herramienta que nos permite ampliar imágenes para ver detalles que para nuestra vista son imperceptibles.