20 de mayo del 2013 Practica No. 8
“separación de fases por centrifugación”
Centro de Bachillerato Tecnológico, Industrial y de Servicios No 103 “Francisco Javier Mina”
Nombre: Lucero Lagunes Cuevas
Grupo: 2 AVC
Materia: Submodulo 1: Toma de Muestras Biológicas
Maestra: Iris Janeth Cruz Mar
PREPARACIÓN DE FASES POR CENTRIFUGACIÓN METODICA Fundamento Si centrifugamos sangre con un anticoagulante podemos obtener una separación de sus componentes en tres fases principales: en el fondo encontraremos los hematíes, por encima de ellos y como una fina capa blanca tendremos los leucocitos y plaquetas, y por último, una capa liquida que es el plasma. Material necesario
Tubos de ensayo
Centrifuga vertical
Pipeta pasteur
1 portaobjetos
Muestra Sangre anticoagulada (EDTA) Técnica Preparamos dos tubos de hemolisis con sangre anticoagulada y tapamos. Centrifugamos a 1500 rpm durante 30 minutos y observamos la aparición de las tres capas.
Lectura de resultados Al observar las 3 fases obtenidas podemos fijarnos en la altura de la columna de hematíes. Esta depende del grado de empaquetamiento de los hematíes, es decir, de la cantidad de plasma que haya quedado retenido entre ellos. Hay varios factores que pueden alterar este empaquetamiento, como son la velocidad de centrifugación, el tipo de centrifuga y la cantidad de anticoagulante empleado.
1. ¿Por qué se separan las células en distintas capas al someterlas a centrifugación? Porque al momento de girar, en la centrifuga se hace una fricción que hace que lo más pesado quede abajo .
2. ¿Cuántas capas obtenemos con esta técnica? 3 3. ¿En qué fase están incluidas las plaquetas? En la de en medió
Resultados obtenidos Mida con una regla la altura de las capas obtenidas. Compare con sus compañeros los resultados obtenidos. 2.5 cm la primera 1 cm la segunda 1.5 cm la tercera
Valoración de los resultados Explique las causas de las posibles diferencias entre los resultados obtenidos
• primero nos pusimos nuestro material de seguridad bata, guantes, cubre pelo etc • continuamos haciendo la venopuncion.
• Despues en los tubos de que nos dieron, en el de EDTA vaciamos con cuidado la sangre y despues en el otro que no tenia nada le vaciamos agua ala misma altura.
• Despues todos pusimos los tubos de sangre en la centrifuga y la encendimos a 1500 rxm por 30 min
• continuamos y esperamos 30 minutos y los sacamos y vimos como la sangre se habia separado en 3 fases, y me parecio muy interesante el como se veia
• Continuamos tomando la evidencia y limpiamos nuestra area de trabajo y terminamos.
• Despues entregamos todo el material que nos habian entregado.
Observaciones En esta práctica observe el cómo usar la centrifuga, ya que si la habíamos utilizado pero ahora en esta práctica vi exactamente como la usaban también observe que en mi equipo hubo m as integración ya que nos repartimos el trabajo y todos hicimos algo, porque el algunas ocasiones solo algunos hacen cosas y otros no, pero este no fue caso, y por eso me gusto esta práctica, también observé el resultado de la sangre y el cómo se separan en 3 capas.
Resultados Obtuvimos una foto en al que apreciábamos todo lo que era la sangre, y en sus capas, lo cual fue muy interesante y me gustó mucho el cómo se veía y también obtuvimos un aprendizaje de cómo utilizar la centrifuga y una vez más practicamos la venopunción.
Conclusiones En conclusión pienso que esta práctica nos dejó muchas enseñanzas que aplicaremos más adelante ya sea en nuestra carrera o aquí mismo en el cbtis, también me gustó mucho que mi equipo y yo fuimos coordinados y acabamos rápido no tanto como hubiésemos querido pero si fuimos rápido. También me gustó mucho el resultado de la practica ya que al ver las capas separadas fue muy impresionante ya que eso es lo que tenemos en el cuerpo.
Lista de Cotejo Presentación
10%
Entrega Oportuna
10%
Hoja o datos de identificación Fundamento
10%
30%
Diagrama de flujo y Observaciones y resultados Conclusiones
10%
30%