Microscopia Diferencias Entre Microscopios 661iv

Microscopio Óptico

Microscopio Electrónico

Microscopio óptico compuesto: Tiene varias lentes y usan luz visible como fuente de iluminación. Con sus lentes talladas permite aumentar muchas veces el tamaño de la muestra real gracias a los rayos luminosos que vienen de la fuente de luz y pasan por el condensador hasta llegar a la muestra, luego los rayos pasan a través de la lente del objetivo (lentes de 10X, 40 X y 100X) y puede finalmente observarse la muestra en el ocular (monocular o binocular). Es usado para observar microorganismos vivos o teñidos

Microscopía electrónica (ME): El microscopio electrónico se ha convertido en una valiosa herramienta para el estudio detallado de estructuras muy pequeñas, virus e incluso moléculas que serían imposibles de ver con microscopía óptica. Aunque la finalidad es la misma existen varias diferencias entre ambos microscopios; los microscopios electrónicos no usa una fuente de luz o fotones sino un haz de electrones que viajan en forma ondulatoria en longitudes de onda mucho menores que la luz blanca lo que aumenta notablemente el poder de resolución. También se diferencia en el uso de lentes electromagnéticas para enfocar la luz en la muestra deshidratada en lugar de lentes de vidrio; no se usan portaobjetos de vidrio sino una rejilla de cobre. Las imágenes obtenidas son a blanco y negro pero se les puede dar color desde el ordenador. No se puede trabajar con organismos vivos. Microscopio electrónico de transmisión (MET): Un haz o rayo de electrones enfocado por un lente condensador electromagnético se dirige sobre una muestra ultra delgada que es atravesada por los electrones dirigidos hacia lentes electromagnéticas del objetivo, éste se encarga de ampliar la imagen y por último enfocarlos en las lentes electromagnéticas proyectoras sobre una pantalla que fluoresce cuando recibe el impacto de los. Se pueden usar sales de metales pesados para “teñir” las muestras. Como desventajas se destaca que los cortes deben ser ultra delgado, fijado y deshidratado en vacío. No genera imágenes tridimensionales. Las microfotografías por ME son a blanco y negro pero son coloreadas desde un ordenador. Microscopio electrónico de barrido (MEB): Un haz de electrones (haz primario) producido por un cañón pasa las lentes electromagnéticas y la muestra que a su vez libera electrones secundarios de la superficie de ésta que pueden ser capturados, detectados y ampliados para producir una imagen tridimensional en una pantalla. A pesar de tener menor resolución que el MET es muy útil para producir imágenes tridimensionales de superficies de células o virus.

Microscopio de campo oscuro: El condensador tiene un disco que bloquea los rayos de luz directa que llegaría a los objetivos, al no tener una luz de fondo directa, la muestra se observa iluminada en los bordes pero con un fondo o campo oscuro; es una técnica muy usada para observar estructuras muy pequeñas como flagelos y espiroquetas por la alta resolución (capacidad de distinguir entre dos puntos) de este tipo de microscopio.

Microscopio de contraste de fase: Con la ayuda de un diafragma anular los rayos de luz de una fuente se reflejan o se difractan en la muestra, mientras que otros rayos la atraviesan, cuando ambos rayos se unen en los oculares se pueden detectar muestras con mayor diferenciación de estructuras internas de células vivas.

Microscopio de fluorescencia: Se utilizan en muestras que fluorescen al exponerse a la luz ultravioleta. Algunas células lo hacen de forma natural como las que contienen clorofila; en las que no fluorescen naturalmente se puede usar fluorocromos (colorantes fluorescentes que tiñen las células) que absorben la longitud de onda corta (luz U.V) y emiten luz visible, que es de mayor longitud de onda. Con este tipo de microscopio la muestra se observa brillante o fluorescente contra un fondo oscuro. Usado para diagnóstico de microorganismos, ecología microbiana o técnicas de inmunofluorescencia (se tiñen anticuerpos para reaccionar con antígenos).

Referencias: http://datateca.unad.edu.co/contenidos/358010/exe/leccin_10_microscopa_ptica_y_electrnica.html